2021学年1.1 DNA重组技术的基本工具课文ppt课件

这是一份2021学年1.1 DNA重组技术的基本工具课文ppt课件，共15页。PPT课件主要包含了作为载体的条件，题型一，题型二，题型三等内容，欢迎下载使用。

1.1　DNA重组技术的基本工具
1.简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
一、基因工程的概念、原理和理论基础1.概念
2.基因工程的原理和理论基础(1)原理:基因重组。(2)理论基础①拼接:不同生物DNA分子的基本组成单位相同,都是4种脱氧核苷酸;空间结构相同,都是规则的双螺旋结构。②表达:生物界共用一套遗传密码,相同的遗传信息在不同生物体内表达出相同的蛋白质。
二、限制性核酸内切酶1.切割后末端的种类
特别提醒(1)当限制酶剪切目的基因一次时,获得的黏性末端或平末端有2个,而不是1个,若剪切目的基因两次,共产生4个黏性末端或平末端。(2)限制酶切割载体的切割位点并不是任意的,必须保证至少有1个完整的标记基因,以便于检测。
2.限制酶和DNA连接酶的关系(1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。(2)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。(3)DNA连接酶起作用时,不需要模板。特别提醒(1)不同DNA分子用同一种限制酶切割形成的黏性末端都相同;同一个DNA分子用不同限制酶切割,产生的黏性末端一般不相同。(2)不同限制酶切割形成的黏性末端,如果互补则可以相互重新配对。
三、与遗传有关的各种酶的比较
作用位点示意图特别提醒(1)DNA连接酶和DNA聚合酶的作用都是催化形成磷酸二酯键,而不是氢键,氢键是分子间的静电吸引力,不需要通过酶的催化形成。(2)DNA连接酶只能在两个DNA片段间形成磷酸二酯键,而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有DNA片段上,且需要以一条DNA链为模板。
题型一 限制酶及其作用特点【例1】 下列有关基因工程中限制酶的描述,正确的是 (　　)A.限制酶只能识别6个或8个脱氧核苷酸组成的序列B.限制酶的活性受温度的影响C.限制酶能识别和切割RNAD.限制酶只能从原核生物中提取解析:限制酶能够识别并切割双链DNA上特定的核苷酸序列,多数限制酶能够识别6个核苷酸组成的序列,少数可以识别4,5或者8个核苷酸组成的序列。限制酶的化学本质是蛋白质,活性受温度影响。限制酶主要从原核生物中获得,同时在某些真核生物(如酵母菌)细胞内也存在。答案:B
题型二 DNA连接酶及其作用特点【例2】 下列有关DNA连接酶的叙述,正确的是(　　)A.T4DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来B.E·cli DNA连接酶能将双链DNA片段平末端之间进行连接C.DNA连接酶能恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键D.DNA连接酶可连接DNA双链的氢键,使双链延伸解析:DNA连接酶能使两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,从而将它们连接起来。E·cli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,不能将双链DNA片段平末端之间进行连接。而T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端,又可以“缝合”双链DNA片段的平末端。答案:C