2020届江苏高考生物考前增分特训仿真小卷（二）（解析版）

2020届江苏高考生物考前增分特训仿真小卷（二）（解析版）
(时间：60分钟　满分：100分)
一、单项选择题(每小题3分，共9小题，共27分)
1.(2019·苏州一模)下列关于细胞中元素和化合物的叙述，错误的是(　　)
A.磷是核糖及核苷酸的组成元素
B.二肽与双缩脲试剂反应不呈现紫色
C.胆固醇是动物细胞膜的重要成分
D.糖类在细胞内的氧化速率比脂肪快
解析　核糖的组成元素只有C、H、O。
答案　A
2.(2019·南通一模)人的胰高血糖素是由29个氨基酸组成的直链多肽，相关叙述正确的是(　　)
A.胰高血糖素分子中至少含有28个肽键和29个羧基
B.胰高血糖素只能由胰岛A细胞合成和分泌
C.加热变性的胰高血糖素不能与双缩脲试剂发生紫色反应
D.胰高血糖素作用的靶器官主要是骨骼肌
解析　胰高血糖素分子中至少含有28个肽键和1个羧基；加热变性的胰高血糖素肽键不变，还能与双缩脲试剂发生紫色反应；胰高血糖素作用的靶器官主要是肝脏。
答案　B
3.(2019·镇江一模)下列有关两种细胞器的叙述，正确的是(　　)

A.人体细胞的有丝分裂离不开这两种细胞器的参与
B.所有动物细胞中都含有甲、乙两种细胞器
C.甲、乙两种细胞器都参与构成细胞的生物膜系统
D.原核细胞中没有细胞器甲只能进行无氧呼吸
解析　哺乳动物成熟的红细胞无细胞器；中心体(乙)无膜，不属于生物膜系统；原核细胞中没有细胞器甲，但只要存在有氧呼吸的酶就可进行有氧呼吸。
答案　A
4.(2019·苏州一模)假设A、b代表玉米的优良基因，这两种基因是独立遗传的。现有AABB、aabb两个品种，为培育出优良品种AAbb，可采用以下两种方法。下列相关叙述错误的是(　　)
方法一：AABB×aabb→F1(自交)→F2(自交)……→AAbb植株
方法二：AABB×aabb→F1，并将F1的花药离体培养获得植株→秋水仙素处理，获得AAbb植株
A.方法一的育种原理是基因重组，该方法操作简便
B.方法一获得AAbb植株，应从F2开始筛选
C.方法二的育种原理是染色体变异，该方法能明显缩短育种年限
D.方法二秋水仙素处理的对象是单倍体的种子或幼苗
解析　方法一是杂交育种，其育种原理是基因重组，该方法操作简便，只需杂交，然后不断自交，从F2开始筛选出具有两种优良性状的植株，再多次自交、筛选，最终获得纯合子，A、B正确；方法二是单倍体育种，其育种原理是染色体变异，该方法用秋水仙素处理的材料是花粉培育的单倍体幼苗，只需两年时间，能明显缩短育种年限，C正确，D错误。
答案　D
5.(2019·扬州一模)下列关于生物进化的叙述，正确的是(　　)
A.变异都可以为进化提供原材料
B.进化的发生可以不通过隔离
C.进化的实质是种群基因文库的变更过程
D.共同进化都是通过物种之间的相互选择共同发展实现的
解析　可遗传变异可为进化提供原材料，不可遗传变异不能为生物进化提供原材料；生物进化的实质是基因频率的改变，基因突变等可遗传变异、自然选择均可能导致基因频率发生改变，故进化的发生不一定要经过隔离；进化的实质是种群基因频率的改变；共同进化是指不同物种之间、生物与环境之间在相互影响中不断进化和发展的过程。
答案　B
6.(2019·南师附中模拟)破骨细胞来自造血干细胞，负责骨组织的吸收。某小组研究叶黄素对破骨细胞生长的影响，实验中将细胞固定于载玻片后，通过对细胞中的TRAP酶进行染色来计数破骨细胞，下列有关叙述错误的是(　　)
组别
TRAP酶染色阳性细胞数/(个·片－1)
对照组
34.16
低剂量叶黄素组
34.27
中剂量叶黄素组
32.71
高剂量叶黄素组
31.88
A.可采用有机溶剂，从植物叶肉组织中提取叶黄素
B.造血干细胞分化过程中遗传物质发生改变，形成破骨细胞
C.中、高剂量的叶黄素可减少破骨细胞数量，抑制骨组织的吸收
D.通过对TRAP酶染色可识别破骨细胞，说明TRAP酶基因在破骨细胞中特异性表达
解析　叶黄素是叶绿体中的色素，溶于有机溶剂而不溶于水；细胞分化的实质是基因的选择性表达，遗传物质不发生改变；根据表格信息可知，中、高剂量叶黄素组的TRAP酶染色阳性细胞数都比对照组少，说明中、高剂量的叶黄素可减少破骨细胞数量，从而抑制骨组织的吸收；通过对TRAP酶染色可识别破骨细胞，说明TRAP酶基因在破骨细胞中特异性表达。
答案　B
7.(2019·扬州市调研)下图表示人体大量运动后补充葡萄糖和氨基酸对胰岛素分泌的影响。下列有关叙述错误的是(　　)

A.运动后摄食葡萄糖更有利于恢复体能
B.大量合成糖原时间是运动摄食后150分钟左右
C.运动摄食后50～100分钟，胰高血糖素的分泌量相对减少
D.补充氨基酸后胰岛素的分泌量变化不太明显的原因可能是氨基酸不易转化为葡萄糖
解析　由图中数据可知，人体大量运动后补充葡萄糖对胰岛素分泌的影响更明显，因此摄食葡萄糖更有利于恢复体能，A正确；运动后补充的葡萄糖浓度下降最快是在100到150分钟之间，此时大量合成糖原，B错误；运动摄食后50～100分钟，血糖浓度较高，则胰岛B细胞的分泌活动增强分泌胰岛素增多，胰岛A细胞的分泌活动减弱分泌胰高血糖素相对减少，进而维持血糖的相对稳定，C正确；胰岛素的分泌量多少受血糖浓度变化的影响，因为氨基酸不易转化为葡萄糖所以补充氨基酸后胰岛素的分泌量变化不太明显，D正确。
答案　B
8.(2019·苏州一模)下图是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意图，下列相关叙述正确的是(　　)
→→→→→
A.挑选葡萄时，去除腐烂的籽粒和枝梗后再冲洗
B.家庭酿酒时加入的少量白砂糖，酵母菌并不能利用
C.A过程后仅需提高一定的环境温度就能产生果醋
D.为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种
解析　为防止杂菌污染，应该在冲洗之前去除腐烂的籽粒，冲洗之后再去除枝梗；家庭酿酒时加入的少量白砂糖属于蔗糖，可以为酵母菌提供碳源，使酒精发酵更快些；A过程是酒精发酵，A过程完后，需要打开充气口、提高温度，才能进行果醋发酵；为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种。
答案　D
9.(2019·扬州一模)下列有关现代生物工程技术应用的叙述，正确的是(　　)
A.“前面造林，后面砍林”的现象违背了系统整体性原理
B.设计试管婴儿性别会引起性别比例失调，违背伦理道德
C.中国政府对于克隆技术的态度是不反对治疗性克隆，可有限制的进行生殖性克隆
D.由于存在生殖隔离，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物不存在生物安全性问题
解析　进行生态工程设计时，要考虑社会—自然—经济的整体影响，即生态工程设计时要遵循整体性原理，否则容易造成“前面造林，后面砍林”的现象，而系统整体性原理即“1＋1＞2”；设计试管婴儿进行遗传病基因检测有利于预防遗传病的发生，但单纯选择胎儿性别是违法的，会引起性别比例失调，并违背伦理道德；中国政府禁止生殖性克隆人，坚持四不原则(不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验)，但是不反对治疗性克隆人；根据目前的研究，对转基因生物的风险还不完全清楚，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物可能存在生物安全性问题。
答案　B
二、多项选择题(每小题5分，共3小题，共15分)
10.(2019·苏锡常镇二模)人类在生产和生活中大量使用抗生素是引起细菌抗药性增强的重要原因。下图是细菌抗药性形成示意图，有关叙述正确的是(　　)

A.易感菌群中出现具有一定抗药性的细菌可能是基因突变的结果
B.抗药性基因传递给其他细菌产生的变异属于基因重组
C.长期使用某种抗生素，就会通过人工选择产生耐该抗生素的菌群
D.抗生素的不合理使用，会导致耐药菌群的出现或造成体内菌群失调
解析　易感菌属于原核生物，遗传物质是DNA，没有染色体，因此抗药性变异的来源不是基因重组和染色变异，可能是基因突变；抗药性基因传递给其他细菌，是通过质粒实现的，质粒将抗药基因在菌株间、菌种间传递，使抗药基因由一个菌体转移到另一个菌体，故属于基因重组；耐药性菌群的形成是经过抗生素的长期自然选择造成的，而非人工选择；抗生素在杀死有害菌的同时将体内的有益菌也杀死，所以会引起体内菌群失调。
答案　ABD
11.(2019·江苏四校联考)对下列四图有关生物学意义的描述，错误的是(　　)

A.若切断甲图c点，则刺激b点后，a点会兴奋，肌肉会收缩
B.若乙图表示人体内各体液间关系，则体内细胞只与A直接进行物质交换
C.丙图中，对向光弯曲的植物而言，若茎背光侧为B对应的生长素浓度，则茎向光侧不可能为C对应的浓度
D.丁图可表示人体骨骼肌细胞线粒体内ATP产生量随氧气浓度的变化情况
解析　甲图中，若在c点切断，刺激b点后产生的兴奋能够传到a点，但不会传到肌肉，因此a点会兴奋，但肌肉不会收缩；若乙图表示人体内各体液间关系，则A是组织液，可与组织细胞直接进行物质交换，B是淋巴，可与淋巴细胞直接进行物质交换，C是血浆，可与血细胞直接进行物质交换，D是细胞内液；单侧光使生长素发生横向运输，导致背光侧生长素浓度高于向光侧，所以丙图中，对向光弯曲的植物而言，若茎背光侧为B对应的生长素浓度，则茎向光侧不可能为C对应的浓度；有氧呼吸的第二、第三阶段是在线粒体中完成的，必须在有氧存在时才能进行，当氧气浓度为零时，线粒体内没有ATP产生，所以丁图不能表示人体骨骼肌细胞线粒体内ATP产生量随氧气浓度的变化情况。
答案　ABD
12.(2019·镇江一模)在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基，在培养皿中培养36小时后统计细菌菌落数(如下表)。下列表述正确的是(　　)
培养皿
培养基成分
培养皿中的菌落数
Ⅰ
琼脂、糖类
35
Ⅱ
琼脂、糖类和维生素
250
Ⅲ
琼脂和维生素
0
A.培养皿Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ表明琼脂是培养基中必须的营养成分
B.培养皿Ⅰ和Ⅱ说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子
C.培养皿Ⅱ和Ⅲ说明糖类是大肠杆菌需要的碳源
D.本实验使用的是固体、不完全培养基
解析　培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源；三个培养皿中都含琼脂，可排除菌落数差异是琼脂造成的；培养皿Ⅰ和Ⅱ说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子；Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类；由于三个实验中都加入了凝固剂琼脂，都是固体培养基。
答案　BCD
三、非选择题(共6小题，共58分)
13.(9分)植物激素中的赤霉素(GA)能诱导α－淀粉酶的产生，促进种子萌发；脱落酸(ABA)能抑制种子萌发。某研究小组分别用三组试剂对(①②③)种子进行处理，所得结果如图所示，图中X是一种mRNA合成抑制剂，“↓”表示开始处理的时间。请回答下列问题：

(1)GA除能促进种子萌发外，还能促进________(填“细胞分裂”或“细胞伸长生长”)，从而促进植物生长。
(2)本实验的自变量是________；图中第②③组结果表现出高度的相似性，说明ABA的作用机制可能是抑制________酶的活性，从而抑制mRNA的合成。在α－淀粉酶的合成方面，ABA与GA表现为________(填“协同”或“拮抗”)作用。
(3)大量事实已经证明内源ABA具有促进脱落的效应，但用ABA作为脱叶剂的田间试验尚未成功，这可能是由于植物体内的________(答出两种即可)对ABA(促进脱落的效应)有抵消作用。进一步研究发现，脱落的器官中乙烯含量明显较高，其原因可能是_____________________________________________________。
(4)植物的生长发育过程受到多种激素的共同调节，但根本上是________在一定时间和空间上程序表达的结果。
解析　(1)GA除能促进种子萌发外，还能促进细胞伸长生长，从而促进植株生长。
(2)从图中可以看出第①组只加GA，第②组加GA和X，第③组加GA和ABA，故本实验的自变量是影响赤霉素作用的试剂种类；图中第②③组结果表现出高度的相似性，说明ABA的作用机制可能是抑制RNA聚合酶的活性，从而抑制mRNA的合成，进而抑制α－淀粉酶的合成，而GA可促进α－淀粉酶的合成，故在α－淀粉酶的合成方面，ABA与GA表现为拮抗作用。
(3)大量事实已经证明内源ABA具有促进脱落的效应，但外源ABA作为脱叶剂的田间试验则没有成功，这可能是由于植物体内的赤霉素(GA)、细胞分裂素或生长素等对ABA(促进脱落的效应)有抵消作用。进一步研究发现，脱落的器官中乙烯含量明显较高，其原因可能是ABA(脱落酸)能促进乙烯的产生。
(4)植物的生长发育过程，在根本上是基因组在一定时间和空间上程序性表达的结果
答案　(1)细胞伸长生长　(2)影响赤霉素作用的试剂种类　RNA聚合　拮抗　(3)赤霉素(GA)、细胞分裂素或生长素等(答出两种即可) 　ABA(脱落酸)能促进乙烯的产生(答案合理即可)　(4)基因组
14.(2019·常州一模)(9分)香瓜果实芳香浓郁，下图为香瓜果实成熟过程中香气物质合成的过程示意图，请据图回答相关问题：

图1
(1)乙烯通过________方式进入靶细胞，与________结合后，通过调控细胞合成________促进香气物质的产生。此种基因与性状的关系属于__________________类型。
(2)转录时，与DNA中起点结合的酶是____________。从图中可看出翻译过程中核糖体的移动方向是________，一个mRNA上结合多个核糖体的意义是____________________________________。
(3)科研人员选取若干生长状态一致的香瓜，随机分为两组进行实验，其结果如下图所示。

图2
据图可知，内源乙烯产生量在第________天达到最高；外源乙烯对L酶活性的促进作用在第7天最显著，理由是____________________。
解析　(1)乙烯是气体，其进入靶细胞的方式是自由扩散；乙烯是一种信号分子，其进入靶细胞后，与受体结合后，通过调控细胞合成L酶促进香气物质的产生。图中基因控制性状的途径是：基因通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而控制生物体的性状。(2)转录时，与DNA中起点结合的酶是RNA聚合酶。根据图中三条肽链的长度可知，翻译过程中核糖体的移动方向是从左向右；一个mRNA上结合多个核糖体同时翻译可以在短时间内合成较多的肽链。(3)据图2可知，对照组在第4天最高，说明此时内源乙烯产生量达到最高；第7天时，外源乙烯处理组与对照组的L酶活性差值最大，说明此时外源乙烯对L酶活性的促进作用最显著。
答案　(1)自由扩散　受体　L酶　基因通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而控制生物体的性状　(2)RNA聚合酶　从左向右　在短时间内合成较多的肽链　(3)4　外源乙烯处理组与对照组的L酶活性差值在第7天时最大
15.(2019·南通一模)(10分)真核生物基因编码区包含外显子和内含子，编码蛋白质的序列称为外显子，不编码蛋白质的序列称为内含子。研究表明肌张力障碍与相关基因内含子中CTG核苷酸序列多次重复有关。下图是肌张力障碍形成的一种假说模型，前体RNA中被剪切下来的重复RNA异常聚集(也称RNA团簇)，使剪接因子失去功能而引起疾病。请回答：

(1)过程①属于________(变异类型)。
(2)过程②所需的原料是________，过程③先断裂再形成的化学键是________。
(3)与图中RNA团簇相比，基因中特有的碱基对是________。RNA团簇使剪接因子失去功能，会导致细胞中________(过程)的模板缺失。
(4)若基因内含子中CCT多次重复，能否引起RNA团簇？____________________，简要说明理由：____________________________。
(5)依据该模型推测，可通过阻断____________________________治疗肌张力障碍。
解析　据图分析，过程①中，基因编码区的内含子中CTG核苷酸序列发生了多次重复，为基因结构的改变，属于基因突变；过程②中基因编码区形成了前体RNA，表示的是转录过程；过程③中，前体RNA在剪切因子的作用下形成成熟mRNA，表示的是mRNA的加工过程；④过程中，以成熟的mRNA为模板，合成了功能蛋白，表示的是翻译。过程⑤表示剪切下来的重复RNA聚集成的RNA团簇。(1)根据以上分析已知，过程①基因内部多了很多重复核苷酸序列，属于基因突变。(2)根据以上分析已知，过程②表示转录，该过程的原料是四种核糖核苷酸；过程③是前体RNA在剪切因子的作用下形成成熟mRNA的过程，因此该过程先断裂再形成的化学键是磷酸二酯键。(3)与图中RNA团簇相比，基因中特有的碱基对是A—T；RNA团簇使剪接因子失去功能，会导致成熟的mRNA不能形成，进而会导致细胞中④翻译的模板缺失。(4)若基因内含子中CCT多次重复，是不会引起RNA团簇的，因为剪切下来的重复RNA不能碱基互补配对。(5)根据该模型推测，可以通过阻断RNA团簇的形成，进而治疗肌张力障碍。
答案　(1)基因突变　(2)核糖核苷酸　磷酸二酯键　(3)A—T　翻译　(4)不能　剪切下来的重复RNA不能碱基互补配对　(5)RNA团簇的形成(或RNA分子间碱基互补配对)
16.(2019·江苏卷，31)(10分)图1为T细胞通过表面受体(TCR)识别抗原递呈细胞呈递的肿瘤抗原后被激活，进而攻击肿瘤细胞的示意图。图2为肿瘤细胞的一种免疫逃逸机制示意图。肿瘤细胞大量表达PD－L1，与T细胞表面的PD－1结合，抑制T细胞活化，逃避T细胞的攻击。请回答下列问题：

(1)图1中抗原递呈细胞通过________方式摄取肿瘤抗原。
(2)图1中T细胞识别肿瘤抗原后被激活，增殖并________形成效应T细胞群和________细胞群。
(3)图1中效应T细胞通过TCR只能识别带有同样抗原的肿瘤细胞，故发挥的免疫作用具有________性，效应T细胞分泌毒素，使肿瘤细胞________死亡。
(4)为阻断图2中肿瘤细胞的免疫逃逸通路，利用单克隆抗体制备技术，制备了抗PD－L1抗体。该抗体注入体内后通过________传送与________________________结合，可解除T细胞的活化抑制。
(5)为应用于肿瘤的临床免疫治疗，需对该抗体进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是_______________________________。
解析　(1)图中抗原递呈细胞通过胞吞将肿瘤抗原摄入到细胞内。(2)T细胞识别肿瘤抗原后，在抗原刺激下增殖分化为效应T细胞群和记忆细胞群。(3)效应T细胞通过TCR只能识别与刺激对应的肿瘤细胞的抗原，无法识别其他抗原，说明该细胞发挥的免疫作用具有特异性。效应T细胞与靶细胞结合后，分泌毒素，使靶细胞裂解死亡。(4)结合题干信息分析，抗PD－L1抗体注入体内后，通过体液运输，与肿瘤细胞表面的PD－L1结合，会阻碍PD－L1与PD－1的结合，从而解除T细胞的活化抑制。(5)对抗体进行人源化改造可以防止人的免疫系统将外来的抗体当做异物而产生免疫排斥反应。
答案　(1)胞吞　(2)分化　记忆　(3)特异　裂解　(4)体液　肿瘤细胞表面的PD－L1　(5)降低免疫排异
17.(2019·淮安市调研)(10分)受污染的水体中富含有机质和N、P等物质(COD表示有机质相对含量，TN、TP分别表示总氮、总磷的含量)。某课题组探究“不同条件下普通小球藻处理废水的能力”，结果如下图所示。回答下列问题：


(1)图1中小球藻对COD的去除能力在________条件下更强，原因是此条件下小球藻生长所需营养物质主要来自____________________。
(2)图1和图2中COD、TN，TP均在第一天有较大幅度的下降，从种群数量变化方面分析，原因是____________________。分析图2曲线可推断在________条件下去除氮、磷效果较好。
(3)对小球藻进行取样计数前，需将培养液________，样液取出后应立即加入固定液。将样液稀释100倍，采用血球计数板(规格为2 mm×2 mm×0.1 mm)计数，观察到的计数室中藻细胞分布见图3，则培养液中藻细胞的密度是________个/mL。血球计数板使用后，正确的清洗方法为________，清洗后可使用________检查是否干净。
解析　(1)由图1可知，黑暗处理时，COD下降速度更快，故小球藻在黑暗条件下对COD的去除能力更强。因为此时小球藻不能进行光合作用，只能进行呼吸作用，其生长所需的物质主要来自于废水中的有机物。(2)由于小球藻的快速增殖，COD、TN、TP都有大幅度的下降，图2中在光照下TN、TP下降更快，故光照下去除氮磷的效果更好。(3)为了避免培养液中小球藻分布不均匀，取样之前需要进行摇匀处理，25个方格中计数4个角和中间方格的小球藻共有4＋4＋4＋3＋5＝20个，每个方格的数目为20/5＝4个，25个方格中共有4×25＝100个，计数板的体积为2×2×0.1＝0.4 mm3，样液的稀释倍数是100倍，1 mL＝103mm3，故1 mL培养液中小球藻的数目是：100/0.4×100×103＝2.5×107个。血球计数板使用后，可以进行浸泡冲洗，可借助显微镜检查是否冲洗干净。
答案　(1)黑暗　废水中的有机物
(2)小球藻种群数量(种群密度)增长较快　光照
(3)摇匀　2.5×107　浸泡、冲洗　显微镜
18.(2019·南京、盐城二模)(10分)图甲为构建重组质粒过程中的三种备选质粒，其中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因。图乙为培育转AFPs基因(抗冻基因)番茄的示意图，外源DNA和质粒上均标出了酶切位点及相关抗性基因，请回答下列问题：


(1)图甲中通常选用质粒C构建重组质粒，而不选用质粒A或质粒B的原因分别是__________________________________________________________________
____________________________________________________________________。
(2)据图乙分析，若需使用插入灭活法筛选并鉴定重组质粒，应优先选用限制酶________________________切割目的基因和质粒。
(3)通过PCR技术获取目的基因时需设计________种引物；从cDNA文库中获得的目的基因________(填“含有”或“不含有”)启动子和终止子。
(4)在构建基因表达载体过程中常把两个启动子串联在一起形成双启动子，加在目的基因上游。双启动子的作用可能是_____________________________________。
(5)图乙农杆菌中的质粒应含有T－DNA，其作用是_____________________。若要获得抗冻能力更强的抗冻番茄，可以对AFPs基因进行改造，最终得到相应的蛋白质，该过程需用到________工程。
(6)为使改造后的AFPs基因能够表达，人工设计质粒D并对它的多个酶切位点进行研究。若用HindⅢ酶或KpnⅠ酶单独切割质粒D，均获得一条长链，若用HindⅢ酶和EcoRⅠ酶同时切割，则获得2个500 bp和1个2666 bp片段，若用KpnⅠ酶和EcoRⅠ酶同时切割，则获得2个250 bp和1个3 166 bp片段。若以HindⅢ酶切割位点为计算起点，则KpnⅠ酶切割位点与HindⅢ酶切割位点最短长度为________，EcoRⅠ酶的两个切割位点与HindⅢ切割位点的最短距离为________。
解析　(1)质粒A缺乏标记基因，质粒B的复制原点中含有限制酶切割位点，可能会破坏复制原点，质粒C含有多个标记基因和酶切位点，适宜作为基因工程的载体。(2)图乙中，选用的质粒C作为基因工程的载体，结合目的基因两端的酶切位点，目的基因和载体可以选择BamHⅠ和HindⅢ同时切割，或者EcoRⅠ和HindⅢ同时切割，若需使用插入灭活法筛选并鉴定重组质粒，应优先选用限制酶BamHⅠ(会破坏Tc)和HindⅢ切割，可以根据是否对四环素有抗性来筛选。(3)利用PCR技术扩增目的基因时，由于DNA聚合酶只能从5′端延伸DNA链，因此要用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增；cDNA文库是用mRNA逆转录得到的DNA，只含有编辑对应蛋白质的信息，没有控制该基因表达的相关元件(启动子、终止子)，也没有内含子，因此cDNA文库的基因没有启动子和终止子。(4)启动子是RNA聚合酶结合的位点，是起始转录的位点，双启动子可能是为了高效转录。(5)农杆菌转化法中的Ti质粒含有的T－DNA可以携带目的基因进入番茄细胞并整合到番茄细胞的染色体DNA上。对AFPs基因进行改造，进而达到改造获得抗冻能力更强的抗冻番茄，需要通过蛋白质工程实现。(6)若用HindⅢ酶或KpnⅠ酶单独切割质粒D，均获得一条长链，说明该质粒上只含有HindⅢ酶的一个酶切位点和KpnⅠ酶的一个酶切位点；若用HindⅢ酶和EcoRⅠ酶同时切割，则获得2个500 bp和1个2 666 bp片段，若用KpnⅠ酶和EcoRⅠ酶同时切割，则获得2个250 bp和1个3 166 bp片段。说明EcoRⅠ酶有2个酶切位点，且两个位点之间的最短距离是500 bp，而KpnⅠ酶的切点在2个EcoRⅠ酶切点之间，距离每个EcoRⅠ酶切点250 bp，HindⅢ酶切点距离最近的EcoRⅠ酶切点的最短距离是500 bp，距离另一个EcoRⅠ酶切点的距离是500＋500＝1 000 bp。故KpnⅠ酶切割位点与HindⅢ酶切割位点最短长度为250＋500＝750 bp，EcoRⅠ酶的两个切割位点与HindⅢ切割位点的最短距离为500 bp。
答案　(1)质粒A中没有标记基因，质粒B的复制原点中含有HindⅢ酶切位点　(2)BamHⅠ和HindⅢ　(3)2　不含有　(4)保证目的基因的高效转录(高效表达)　(5)携带目的基因进入番茄细胞并整合到番茄细胞的染色体DNA　蛋白质　(6)750 bp　500 bp