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高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数综合训练题
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这是一份高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数综合训练题试卷主要包含了需要在火焰旁操作的有等内容，欢迎下载使用。
1.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )。
A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B.以尿素为唯一氮源的培养基中加二苯胺试剂
C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
解析:细菌合成的脲酶可以催化尿素分解形成氨。氨会使培养基的碱性增强,pH升高。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂变红,则说明该细菌能产生脲酶分解尿素。
答案:A
2.关于微生物的培养,下列叙述错误的是( )。
A.细菌一般在30~37 ℃的温度下培养1~2 d
B.放线菌一般在25~28 ℃的温度下培养5~7 d
C.霉菌一般在25~28 ℃的温度下培养3~4 d
D.不同种类的微生物,一般需要相同的培养温度和培养时间
解析:不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和时间。
答案:D
3.
在培养基中加入尿素(唯一氮源),以分离出能分解尿素的细菌,这种加入尿素的培养基在功能上属于( )。
A.选择培养基B.固体培养基
C.液体培养基D.半固体培养基
解析:题中的培养基能分离出以尿素为唯一氮源的细菌,故从功能上讲是一种选择培养基。
答案:A
4.需要在火焰旁操作的有( )。
①土壤取样 ②称取土壤 ③稀释土壤溶液 ④涂布平板 ⑤微生物的培养
A.①②③④⑤B.②③④⑤
C.③④⑤D.②③④
解析:除了土壤取样和微生物的培养不便于在火焰旁进行外,其他均要在火焰旁进行,以防止杂菌污染。
答案:D
5.以下关于分解尿素的细菌的说法,正确的是( )。
A.能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶
B.以尿素作为唯一的碳源
C.环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性
D.以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基培养该菌后不会使酚红指示剂变红
解析:A项:酶具有专一性,分解尿素的细菌之所以能分解尿素是因为能合成分泌脲酶。B项:该菌能以葡萄糖作为碳源。C项:环境中含有大量的尿素对分解尿素的性状起了选择作用而非诱导作用。D项:该菌产生脲酶把尿素分解为氨后,使pH升高,酚红指示剂变红,但添加酸碱缓冲剂后,阻止了pH的升高,因此培养基不再使酚红指示剂变红。
答案:D
6.稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌时使用的涂布器应保存在体积分数为70%的酒精中,取出后又要放在酒精灯火焰上引燃,这两步分别属于什么技术?( )
A.灭菌、灭菌B.消毒、消毒
C.灭菌、消毒D.消毒、灭菌
解析:消毒和灭菌是不同的。往往消毒比较温和,仅仅消灭危害健康的致病菌;而灭菌就比较强烈,如高压蒸汽、灼烧等,它是杀死一切菌。因此本题前者属消毒,后者属灭菌。
答案:D
7.通常用来作为菌种鉴定的重要依据是( )。
A.菌落B.细菌形态
C.细菌体积D.细菌结构
解析:细菌个体非常小,不易直接观察,而不同细菌菌落的形态特征不同,且可用肉眼观察,常作为鉴定菌种的依据。
答案:A
8.下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是( )。
A.微生物培养前,需对培养基进行消毒
B.测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法
C.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度
D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一氮源
解析:微生物培养前,需对培养基进行灭菌处理,要将所有微生物杀死;当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌;土壤中各类微生物的数量是不同的,为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离,同时还应当有针对性地提供选择培养条件。
答案:A
9.测定土壤中不同微生物的数量,要选用不同倍数的稀释液进行平板培养,请选出培养细菌时所用的稀释倍数( )。
①102 ②103 ③104 ④105 ⑤106
A.①②③B.②③④
C.③④⑤D.①④⑤
解析:土壤中细菌的数量非常多,一般选取的稀释倍数比较高。
答案:C
10.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触),将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天,结果如下图所示。从实验结果分析,以下叙述不正确的是( )。
A.链霉素能阻止结核菌的生长
B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效
C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效
D.链霉素可以用于治疗伤寒病人
解析:从图中可以看出,这是含有链霉素的选择培养基,接种的3种细菌中,霍乱菌和结核菌都可以被杀灭,并且链霉素对结核菌杀灭的有效程度大于霍乱菌。而伤寒菌照常生长不受影响,所以选项D错误。
答案:D
11.下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法,错误的是( )。
A.因为土壤中各类微生物的数量不同,所以,为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离
B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同
C.如果得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数
D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
解析:样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落的数目。实际操作中,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落在30~300之间适于计数的平板。测定土壤中细菌的数量,一般选用104、105和106倍的稀释液;测定放线菌的数量一般选用103、104和105倍的稀释液;测定真菌的数量,一般选用102、103和104倍的稀释液。将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,从而说明选择培养基的筛选作用。
答案:D
12.马丁培养基是实验室常用的培养基之一。下表为马丁培养基的化学成分,据此回答下列问题。
(1)该培养基中加入了链霉素,能抑制细菌和放线菌,但真菌可以在上面生长,因此培养基是一种 培养基。
(2)葡萄糖能给微生物生长提供 和 。
(3)蛋白胨能给微生物生长提供 和 。
(4)培养基中KH2PO4·3H2O可给微生物提供含 的无机盐。
(5)琼脂的作用是作为 。
解析:链霉素能抑制细菌和放线菌生长,真菌可以在上面生长,因此该培养基是一种选择培养基。葡萄糖是一种含碳的有机物,既可给微生物提供碳源,又可给微生物提供能源。该培养基蛋白胨可以给微生物提供氮源和维生素。
答案:(1)选择 (2)碳源 能源 (3)氮源 维生素 (4)K、P (5)凝固剂
13.探究如何从土壤中分离自生固氮菌并计数。
实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表层土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。
材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9 mL无菌水的大试管若干、无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。
方法步骤:
(1)倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在 操作。
(2)制备土壤稀释液。取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液 1 mL,转至9 mL无菌水的大试管中,依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作,试管口和移液管应在离火焰 cm处。
(3)涂布。按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布 个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布 个平板。
(4)培养。放入恒温箱内,在适宜温度条件下培养3~4 d。一般每隔 h统计一次,选取 时的记录作为结果,这样可以防止 。
(5)细菌的计数。当菌落数目稳定时,选取菌落数在 的平板进行计数。如果测试的平均值为50,则每克样品中的菌株数是 。(稀释度是105)
(6)预期结果。相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数 (填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。理由是
。
解析:要分离自生固氮菌,采用选择培养基分离的方法,缺乏氮源的培养基可用来分离自生固氮微生物,而其他微生物因缺乏氮源不能生长。实验步骤一般是:配制无氮培养基→灭菌→倒平板→系列稀释→涂布平板→培养→观察并计数。实验中要注意无菌操作和设计对照等。
答案:(1)酒精灯火焰旁 (2)1~2 (3)3 1 (4)24 菌落数目稳定 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目
(5)30~300 5×107
(6)多于 无氮培养基上可以生存和繁殖的只是土壤中的自生固氮菌,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类的生存
14.某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到了能高效降解化合物A的细菌(“目的菌”)。请分析回答下列问题。
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选 ,这种培养基属于 培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 ,实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是 。
(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量 的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量 。
(4)可采用 的方法将“目的菌”接种到固体培养基上,通过 法对“目的菌”的数量进行统计,通常需要对菌落数为 的平板进行计数。
(5)实验结束时,使用过的培养基应该进行 处理后,才能倒掉。
解析:(1)培养基中加入的磷酸盐、镁盐以及微量元素,不能作为碳源和氮源,可推测加入的化合物A提供微生物生存所需的碳源和氮源,这样可以筛选出能够降解化合物A的微生物,这种培养基为选择培养基。(2)化合物A提供氮源和碳源,振荡可以增加培养基中氧气的含量,说明该微生物的代谢类型为异养需氧型。(3)培养若干天应该向消耗化合物A的培养基中加入新的培养液连续培养,使“目的菌”的数量逐渐增多。(4)可采用稀释涂布平板法将“目的菌”接种到固体培养基上,通过计数平板中的菌落数推算出活菌的个数,通常应该对菌落数为30~300的平板进行计数,然后求其平均值作为活菌数。(5)实验结束后对所使用的培养基应该进行灭菌处理,防止污染环境和感染操作者本身。
答案:(1)“目的菌” 选择 (2)化合物A 异养需氧型
(3)减少 增加 (4)稀释涂布平板 活菌计数 30~300 (5)灭菌
成分
含量
成分
含量
KH2PO4·3H2O
0.1 g
葡萄糖
1 g
MgSO4·7H2O
0.05 g
蛋白胨
0.5 g
0.1%孟加拉红溶液
0.33 mL
琼脂
1.5~2 g
2%去氧胆酸钠溶液
2 mL
H2O
100 mL
链霉素溶液(1×104 μ/mL)
0.33 mL
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1.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )。
A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B.以尿素为唯一氮源的培养基中加二苯胺试剂
C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
解析:细菌合成的脲酶可以催化尿素分解形成氨。氨会使培养基的碱性增强,pH升高。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂变红,则说明该细菌能产生脲酶分解尿素。
答案:A
2.关于微生物的培养,下列叙述错误的是( )。
A.细菌一般在30~37 ℃的温度下培养1~2 d
B.放线菌一般在25~28 ℃的温度下培养5~7 d
C.霉菌一般在25~28 ℃的温度下培养3~4 d
D.不同种类的微生物,一般需要相同的培养温度和培养时间
解析:不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和时间。
答案:D
3.
在培养基中加入尿素(唯一氮源),以分离出能分解尿素的细菌,这种加入尿素的培养基在功能上属于( )。
A.选择培养基B.固体培养基
C.液体培养基D.半固体培养基
解析:题中的培养基能分离出以尿素为唯一氮源的细菌,故从功能上讲是一种选择培养基。
答案:A
4.需要在火焰旁操作的有( )。
①土壤取样 ②称取土壤 ③稀释土壤溶液 ④涂布平板 ⑤微生物的培养
A.①②③④⑤B.②③④⑤
C.③④⑤D.②③④
解析:除了土壤取样和微生物的培养不便于在火焰旁进行外,其他均要在火焰旁进行,以防止杂菌污染。
答案:D
5.以下关于分解尿素的细菌的说法,正确的是( )。
A.能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶
B.以尿素作为唯一的碳源
C.环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性
D.以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基培养该菌后不会使酚红指示剂变红
解析:A项:酶具有专一性,分解尿素的细菌之所以能分解尿素是因为能合成分泌脲酶。B项:该菌能以葡萄糖作为碳源。C项:环境中含有大量的尿素对分解尿素的性状起了选择作用而非诱导作用。D项:该菌产生脲酶把尿素分解为氨后,使pH升高,酚红指示剂变红,但添加酸碱缓冲剂后,阻止了pH的升高,因此培养基不再使酚红指示剂变红。
答案:D
6.稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌时使用的涂布器应保存在体积分数为70%的酒精中,取出后又要放在酒精灯火焰上引燃,这两步分别属于什么技术?( )
A.灭菌、灭菌B.消毒、消毒
C.灭菌、消毒D.消毒、灭菌
解析:消毒和灭菌是不同的。往往消毒比较温和,仅仅消灭危害健康的致病菌;而灭菌就比较强烈,如高压蒸汽、灼烧等,它是杀死一切菌。因此本题前者属消毒,后者属灭菌。
答案:D
7.通常用来作为菌种鉴定的重要依据是( )。
A.菌落B.细菌形态
C.细菌体积D.细菌结构
解析:细菌个体非常小,不易直接观察,而不同细菌菌落的形态特征不同,且可用肉眼观察,常作为鉴定菌种的依据。
答案:A
8.下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是( )。
A.微生物培养前,需对培养基进行消毒
B.测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法
C.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度
D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一氮源
解析:微生物培养前,需对培养基进行灭菌处理,要将所有微生物杀死;当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌;土壤中各类微生物的数量是不同的,为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离,同时还应当有针对性地提供选择培养条件。
答案:A
9.测定土壤中不同微生物的数量,要选用不同倍数的稀释液进行平板培养,请选出培养细菌时所用的稀释倍数( )。
①102 ②103 ③104 ④105 ⑤106
A.①②③B.②③④
C.③④⑤D.①④⑤
解析:土壤中细菌的数量非常多,一般选取的稀释倍数比较高。
答案:C
10.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触),将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天,结果如下图所示。从实验结果分析,以下叙述不正确的是( )。
A.链霉素能阻止结核菌的生长
B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效
C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效
D.链霉素可以用于治疗伤寒病人
解析:从图中可以看出,这是含有链霉素的选择培养基,接种的3种细菌中,霍乱菌和结核菌都可以被杀灭,并且链霉素对结核菌杀灭的有效程度大于霍乱菌。而伤寒菌照常生长不受影响,所以选项D错误。
答案:D
11.下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法,错误的是( )。
A.因为土壤中各类微生物的数量不同,所以,为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离
B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同
C.如果得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数
D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
解析:样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落的数目。实际操作中,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落在30~300之间适于计数的平板。测定土壤中细菌的数量,一般选用104、105和106倍的稀释液;测定放线菌的数量一般选用103、104和105倍的稀释液;测定真菌的数量,一般选用102、103和104倍的稀释液。将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,从而说明选择培养基的筛选作用。
答案:D
12.马丁培养基是实验室常用的培养基之一。下表为马丁培养基的化学成分,据此回答下列问题。
(1)该培养基中加入了链霉素,能抑制细菌和放线菌,但真菌可以在上面生长,因此培养基是一种 培养基。
(2)葡萄糖能给微生物生长提供 和 。
(3)蛋白胨能给微生物生长提供 和 。
(4)培养基中KH2PO4·3H2O可给微生物提供含 的无机盐。
(5)琼脂的作用是作为 。
解析:链霉素能抑制细菌和放线菌生长,真菌可以在上面生长,因此该培养基是一种选择培养基。葡萄糖是一种含碳的有机物,既可给微生物提供碳源,又可给微生物提供能源。该培养基蛋白胨可以给微生物提供氮源和维生素。
答案:(1)选择 (2)碳源 能源 (3)氮源 维生素 (4)K、P (5)凝固剂
13.探究如何从土壤中分离自生固氮菌并计数。
实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表层土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。
材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9 mL无菌水的大试管若干、无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。
方法步骤:
(1)倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在 操作。
(2)制备土壤稀释液。取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液 1 mL,转至9 mL无菌水的大试管中,依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作,试管口和移液管应在离火焰 cm处。
(3)涂布。按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布 个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布 个平板。
(4)培养。放入恒温箱内,在适宜温度条件下培养3~4 d。一般每隔 h统计一次,选取 时的记录作为结果,这样可以防止 。
(5)细菌的计数。当菌落数目稳定时,选取菌落数在 的平板进行计数。如果测试的平均值为50,则每克样品中的菌株数是 。(稀释度是105)
(6)预期结果。相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数 (填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。理由是
。
解析:要分离自生固氮菌,采用选择培养基分离的方法,缺乏氮源的培养基可用来分离自生固氮微生物,而其他微生物因缺乏氮源不能生长。实验步骤一般是:配制无氮培养基→灭菌→倒平板→系列稀释→涂布平板→培养→观察并计数。实验中要注意无菌操作和设计对照等。
答案:(1)酒精灯火焰旁 (2)1~2 (3)3 1 (4)24 菌落数目稳定 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目
(5)30~300 5×107
(6)多于 无氮培养基上可以生存和繁殖的只是土壤中的自生固氮菌,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类的生存
14.某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到了能高效降解化合物A的细菌(“目的菌”)。请分析回答下列问题。
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选 ,这种培养基属于 培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 ,实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是 。
(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量 的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量 。
(4)可采用 的方法将“目的菌”接种到固体培养基上,通过 法对“目的菌”的数量进行统计,通常需要对菌落数为 的平板进行计数。
(5)实验结束时,使用过的培养基应该进行 处理后,才能倒掉。
解析:(1)培养基中加入的磷酸盐、镁盐以及微量元素,不能作为碳源和氮源,可推测加入的化合物A提供微生物生存所需的碳源和氮源,这样可以筛选出能够降解化合物A的微生物,这种培养基为选择培养基。(2)化合物A提供氮源和碳源,振荡可以增加培养基中氧气的含量,说明该微生物的代谢类型为异养需氧型。(3)培养若干天应该向消耗化合物A的培养基中加入新的培养液连续培养,使“目的菌”的数量逐渐增多。(4)可采用稀释涂布平板法将“目的菌”接种到固体培养基上,通过计数平板中的菌落数推算出活菌的个数,通常应该对菌落数为30~300的平板进行计数,然后求其平均值作为活菌数。(5)实验结束后对所使用的培养基应该进行灭菌处理,防止污染环境和感染操作者本身。
答案:(1)“目的菌” 选择 (2)化合物A 异养需氧型
(3)减少 增加 (4)稀释涂布平板 活菌计数 30~300 (5)灭菌
成分
含量
成分
含量
KH2PO4·3H2O
0.1 g
葡萄糖
1 g
MgSO4·7H2O
0.05 g
蛋白胨
0.5 g
0.1%孟加拉红溶液
0.33 mL
琼脂
1.5~2 g
2%去氧胆酸钠溶液
2 mL
H2O
100 mL
链霉素溶液(1×104 μ/mL)
0.33 mL
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