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北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第一节 基因工程的原理当堂检测题
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这是一份北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第一节 基因工程的原理当堂检测题，共16页。试卷主要包含了下图表示三种限制酶BamHⅠ等内容，欢迎下载使用。
1．基因工程操作离不开三种工具，下列有关说法不正确的是（ ）
A．常用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒，从而获得互补的黏性末端
B．在三种工具中最常用载体——质粒的基本单位是脱氧核糖核苷酸，两种酶的基本单位是氨基酸
C．DNA聚合酶能够催化形成磷酸二酯键，是基因工程中的“分子缝合针”
D．限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力
2．用限制酶处理DNA片段，可使特定核苷酸序列特定部位的磷酸二酯键断开。若用X．Y两种限制酶作用于图中的DNA片段，并进行电泳分析，其结果如下图。 A~D选项中，关于两种酶的酶切位置的判断，正确的是（ ）
A．
B．
C．
D．
3．下列关于基因工程载体的叙述，不正确的是（ ）
A．可用自然质粒作为基因工程的载体B．有自我复制能力
C．对受体细胞无害D．可以是动植物病毒
4．有关限制性内切酶 Hind Ⅲ和 Xh I 的识别序列及切割位点分别为 A↓AGCTT 和C↓TCGAG，相关叙述正确的是（ ）
A．两种限制酶的识别序列在 DNA 分子中出现的概率不同
B．两种限制酶切割形成的粘性末端都是-AGCT
C．分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒
D．实验中可通过控制反应时间．酶的浓度等控制酶切效果
5．下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（ ）
A．基因工程又叫DNA拼接技术，所用的工具酶有限制酶和DNA聚合酶
B．所有的限制性酶识别同一种特定的核苷酸序列
C．只要目的基因进入了受体细胞就能成功的表达，不需要再进行检测
D．基因工程常用的运载体有噬菌体．动植物病毒和质粒
6．图甲表示某环型 DNA 分子经限制性内切核酸酶（EcRⅠ）完全酶切后的片段电泳结果。若改变条件使其酶 切不充分就有可能获得如图乙所示的电泳结果（kb 即千个碱基对）。下列叙述错误的是（ ）
A. 该 DNA 分子全长至少为 7 kb，该 DNA 分子中至少含有 4 个 EcRⅠ酶切位点
B. 适当缩短反应时间，得到图乙结果的可能性越大
C. 限制性内切核酸酶的化学本质都是蛋白质
D. 适当增加 EcRⅠ浓度，更可能得到图乙的结果
7．质粒是基因工程中常用的载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置（插入点有a．b．c），请根据表中提供的细菌生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因的插入点，正确的一组是（ ）
A．①是c；②是b；③是a
B．①是a和b；③是b
C．①是a和b；②是b；③是a
D．①是；②是a；③是b
8．下图表示三种限制酶BamHⅠ．BglⅡ和MbⅠ的识别序列和切割位点，下列叙述不正确的是（ ）
A．三种限制酶作用的化学键相同
B．三种限制酶切割DNA分子后能形成相同的黏性末端
C．能被BamHⅠ或BglⅡ切割的位点也能被MbⅠ切割
D．能被MbⅠ切割的位点一定能被BamHⅠ或BglⅡ切割
9．用 XhI 和 SalI 两种限制性核酸内切酶分别处理同一 DNA 片段，酶切位点及酶切产物分离结果 如图。以下叙述错误的是（ ）
A．不同限制性核酸内切酶区别就在于识别核苷酸序列的不同
B．如图中两种限制酶切割形成的粘性末端可能相同
C．泳道①中是用 SalI 处理得到的酶切产物
D．若用 XhI 和 SalI 两种酶同时处理该 DNA 片段后电泳，其泳道可能只有 5 条
10．用XhⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。下列叙述 正确的是（ ）
A．电泳是指不带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程
B．泳道①中是用XhI处理得到的酶切产物
C．图中两种酶识别的序列不同．酶切产物不可用于构建重组DNA
D．电泳技术可以用于人类亲子鉴定．生物间亲缘关系的鉴定
11．下列有关基因工程的叙述，错误的是（ ）
A．基因工程所用的工具酶是限制酶．DNA连接酶
B．DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来
C．利用基因工程技术，可以定向地改造生物的遗传性状
D．基因工程的实质是基因重组
12．下列有关基因工程中操作工具的叙述，正确的是（ ）
A．运载体的化学本质与载体蛋白相同
B．限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸
C．DNA连接酶可以催化脱氧核苷酸链间形成氢键
D．EcliDNA连接酶既可以“缝合”黏性末端，也可以“缝合”平末端
13．DNA连接酶是重组DNA技术中常用的一种工具酶。下列相关叙述，正确的是（ ）
A．能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键
B．能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键
C．能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键
D．只能连接双链DNA片段互补的黏性末端，不能连接双链DNA片段的平末端
14．下列关于DNA连接酶的叙述，不正确的是（ ）
A．制备重组DNA需要DNA连接酶
B．DNA连接酶按来源可分为E·cliDNA连接酶和T4DNA连接酶
C．T4DNA连接酶可连接双链DNA片段间的磷酸和核糖
D．E·cliDNA连接酶只能连接具有黏性末端的双链DNA片段
15．图（a）依次为EcR I．BalH I和Sau3A I三种限制酶识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体示意图，下列有关分析正确的是（ ）
A．DNA片段被BamH I．Sau3A I酶切后可形成不同的黏性末端
B．不能使用限制酶EcR I．BamH I获取目的基因
C．抗生素抗性基因可用于鉴别目的基因是否表达
D．使用限制酶EcR I．Sau3A I切割质粒可防止自身环化
16．下列各种酶及其作用对应关系不正确的是（ ）
A．限制酶—识别并在特定位置切断 DNA 分子中的磷酸二酯键
B．RNA 聚合酶—与基因的特定位点结合，催化遗传信息的翻译
C．DNA 连接酶—将分开的 DNA 片段通过特定末端连接在一起
D．DNA 聚合酶—将单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成 DNA 单链
17．关于生物育种的叙述，正确的是（ ）
A．诱变育种的遗传学原理是染色体结构变异
B．能集中双亲优良性状的育种方法只有杂交育种
C．基因工程育种所用的工具酶有限制酶．DNA连接酶和运载体
D．培育产胰岛素的大肠杆菌，依据的遗传学原理是基因重组
18．下列关于质粒的叙述，正确的是（ ）
A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器
B．质粒是细菌细胞中能够自主复制的小型环状DNA分子
C．质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制
D．细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的
参考答案与试题解析
1．【答案】C
【解析】
试题分析：
基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；
（3）运载体：常用的运载体：质粒．噬菌体的衍生物．动植物病毒。
解答：
A．构建基因表达载体时，常用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒，以产生相同的黏性末端，A正确；
B．在三种工具中最常用载体--质粒的化学本质是DNA，其基本单位是脱氧核糖核苷酸；两种酶的化学本质是蛋白质，其基本单位是氨基酸，B正确；
C．DNA连接酶能够催化形成磷酸二酯键，是基因工程中的“分子缝合针”，C错误；
D．限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力，即具有专一性，D正确。
故选C。
2．【答案】B
【解析】
试题分析：
分析示意图可知，X和Y酶酶切结果是获得长度为4500．3500．1500和500碱基对的片段，X酶酶切结果是获得长度6000．3500和500碱基对的片段，Y酶酶切结果是获得长度为8000．2000碱基对的DNA片段。
解答：
A．用X．Y两种限制酶作用于图中的DNA片段，得到的是4500．3500．1500和500碱基对的片段，用Y酶切割得到的是500和9500的片段，A错误；
B．用X．Y两种限制酶作用于图中的DNA片段，得到的是4500．3500．1500和500碱基对的片段，用X酶切割得到的是3500．6000．500的片段，用Y酶切割得到的是8000和2000的片段，B正确；
C．用Y酶切割得到的是1500和8500的片段，C错误；
D．用X酶切割得到的是500．5000和4500的片段，D错误。
故选B。
3．【答案】A
【解析】
试题分析：
载体指在基因工程中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。载体的选择需要满足如下条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因；③能够在宿主细胞中稳定存在并复制；④对受体细胞无害，且易从供体细胞中分离出来。
解答：
A．自然质粒可能不具备某些限制酶的切点，必须经过改造才能作为基因工程的载体，A错误；
B．作为基因工程的载体必须具有有自我复制能力，B正确；
C．对受体细胞无害是基因工程载体必备的特点，C正确；
D．基因工程的载体有质粒．动植物病毒和λ噬菌体衍生物，D正确。
故选A。
4．【答案】D
【解析】
由题可知，限制性内切酶HindⅢ和Xh I的识别序列刚好互补（AG与TC互补），因此两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率相同，A错误；HindⅢ切割形成的粘性末端是-AGCTT，而Xh I切割形成的粘性末端都是-TCGAG，B错误；两种限制酶切割形成的粘性末端不相同，不能互补，C错误；实验中可通过控制反应时间．酶的浓度等控制酶切效果，D正确。
5．【答案】D
【解析】
试题分析：
重组DNA技术所用的工具是限制性内切酶．连接酶和运载体．限制性内切酶具有特异性，能识别特定的核苷酸序列;基因工程成功率很小，在操作过程中要经常筛选,原核生物特点：繁殖快．多为单细胞．遗传物质相对较少等.
解答：
A．基因工程的工具酶包括限制酶和DNA连接酶， A错误；
B．限制性核酸内切酶具有特异性，一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列并在特定的位点进行切割，B错误；
C．目的基因进入受体细胞不一定能成功地实现表达，还需检测和鉴定，C错误；
D．基因工程常用的运载体有噬菌体．动植物病毒和质粒，D正确。
故选D。
6．【答案】D
【解析】题图分析：环型DNA分子经限制性核酸内切酶（EcRⅠ）完全酶切后得到4.0．1.5．1.0和0.5四种长度的DNA片段，说明该DNA分子全长至少为7Kb，至少含有4个EcRⅠ酶切位点；若改变条件使其酶 切不充分就有可能获得如图乙所示的电泳结果。结合图示可知，该环状DNA中四个酶切位点的距离依次为4kb．0.5kb．1.5kb．1kb。
A．环型DNA分子经限制性核酸内切酶（EcRⅠ）完全酶切后得到4.0．1.5．1.0和0.5四种长度的DNA片段，说明该DNA分子全长至少为7Kb；由于是环型DNA分子，被限制性核酸内切酶（EcRⅠ）完全酶切后得到至少4个DNA片段，说明该DNA分子中至少含有4个EcRⅠ酶切位点，A正确；
B．适当缩短反应时间，酶切不充分，得到图乙结果的可能性越大，B正确；
C．限制性核酸内切酶主要来自原核生物，化学本质都是蛋白质，C正确；
D．适当增加EcRⅠ浓度，DNA被切割更充分，更可能得到图甲的结果，D错误。
故选D。
7．【答案】A
【解析】
试题分析：
分析图形可知：
（1）a是抗氨苄青霉素基因，如果外源基因插入到a中，此基因结构被破坏，细菌无抗氨苄青霉素能力。将细菌放入含有氨苄青霉素培养基上生长，则会死亡；相反，会存活。
（2）b是抗四环素基因，如果外源基因插入到b中，抗四环素基因结构被破坏，细菌无抗四环素能力。将细菌放入含有四环素培养基上生长，则会死亡；相反，会存活。
解答：
第①组：细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因没有被破坏。由此可知，外源基因插入的位置不是a．b，而是c；
第②组：细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌不能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因被破坏。说明了外源基因插入位置是b，不是a；
第③组：细胞不能在含氨苄青霉素培养基上生长，能在含四环素培养基上的生长，说明抗氨苄青霉素基因被破坏，抗四环素基因没有被破坏，由此可知，外源基因插入的位置是a，而不是b。
故选A。
8．【答案】D
【解析】
试题分析：
一种限制酶只能识别一种特定的DNA序列，且只能在特定的位点切割。
解答：
A．三种限制酶作用的化学键均为磷酸二酯键，A正确；
B．三种限制酶切割产生的黏性末端均为GATC，B正确；
C．能被BamHⅠ或BglⅡ切割的位点一定含有GATC的序列，该序列可以被MbⅠ识别，故可以被其切割，C正确；
D．能被MbⅠ切割的位点不一定能被BamHⅠ或BglⅡ识别，故不一定能被其切割，D错误。
故选D。
9．【答案】A
【解析】
试题分析：
分析题图：限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物；限制酶XhⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhⅠ处理得到的酶切产物。
解答：
A．不同的限制酶识别并切割的核苷酸序列不同，形成的末端也可能不同，A错误；
B．用相同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端是一定相同的，用不同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端也可能是相同的，B正确；
C．限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物，C正确；
D．由题干信息：限制酶在对应切点一定能切开，可知用XhⅠ和SalⅠ同时处理该DNA电泳后得到6种产物，6种产物中有可能有两两相同长度的DNA片段，因此其泳道可能只有5条，D正确。
故选A。
10．【答案】D
【解析】
试题分析：
分析题图：限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物；限制酶XhⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhⅠ处理得到的酶切产物。
解答：
A．电泳是指带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程，A错误；
B．限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物，B错误；
C．不同的限制酶识别并切割的核苷酸序列不同，因此图1中两种酶识别的核苷酸序列不同，但是酶切产物可用于构建重组DNA ，C错误；
D．电泳技术可以用于人类亲子鉴定．生物间亲缘关系的鉴定，D正确。
故选D。
11．【答案】B
【解析】
试题分析：
基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）运载体：常用的运载体：质粒．噬菌体的衍生物．动植物病毒
解答：
A．由分析可知，基因工程所用的工具酶是限制酶．DNA连接酶，A正确；
B．DNA连接酶将黏性末端的磷酸二酯键连接起来，B错误；
C．利用基因工程技术，可以定向地改造生物的遗传性状，C正确；
D．基因工程的本质是基因重组，D正确。
故选B。
12．【答案】B
【解析】
试题分析：
限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
质粒是一种裸露的．结构简单．独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
DNA连接酶是在两个具有相同末端的DNA片段之间形成磷酸二酯键。
解答：
A．运载体的化学本质是环状的DNA，而细胞膜上载体的化学本质是蛋白质，A错误；
B．限制酶能识别并切割DNA分子，而烟草花叶病毒的遗传物质是RNA，B正确；
C．DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成磷酸二酯键，C错误；
D．EcliDNA连接酶只能“缝合”黏性末端，D错误。
故选B。
13．【答案】C
【解析】
试题分析：
DNA连接酶：（1）根据酶的来源不同分为两类：E．cliDNA连接酶．T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。
解答：
A．DNA连接酶连接的磷酸二酯键，A错误；
B．DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键，B错误；
C．能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键，C正确；
D．有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，D错误。
故选C。
14．【答案】C
【解析】
试题分析：
“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶（E·cliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：
①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·cliDNA连接酶来源大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
解答：
A．制备重组DNA需要将运载体与目的基因连接，要用到DNA连接酶，A正确；
B．DNA连接酶按来源可分为E·cliDNA连接酶和T4DNA连接酶，B正确；
C．T4DNA连接酶可连接双链DNA片段间的磷酸和脱氧核糖，C错误；
D．E·cliDNA连接酶只能连接具有黏性末端的双链DNA片段，D正确。
故选C。
15．【答案】D
【解析】
试题分析：
关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来；
（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；
（3）结果：形成黏性末端或平末端。
解答：
A．DNA片段被BamH I．Sau3A I酶切后可形成相同的黏性末端—GATC—，A错误；
B．由于不清楚目的基因的结构，所以不确定获得目的基因需要的限制酶，B错误；
C．抗生素抗性基因不能鉴别目的基因是否表达，可以供重组DNA的鉴定和选择，C错误；
D．使用不同的限制酶切割质粒可防止自身环化，D正确。
故选D。
16．【答案】B
【解析】
试题分析：
生物工程中酶的作用：
1．DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用，在基因工程中起作用。
2．DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起做用。
3．限制性核酸内切酶：从DNA链的内部进行切割，分为限制性内切酶和非限制性内切酶。
4．DNA修饰酶是指对DNA分子进行修饰的酶，目前基因工程中常用的酶有：碱性磷酸酶．末端转移酶．甲基化酶。
5．反转录酶：依赖于RNA的DNA聚合酶，既可以用DNA为模板，也可以用RNA为模板进行互补链的合成。基因工程中主要功能是利用真核mRNA为模板反转录cDNA，用来建立cDNA文库，进而分离为特定蛋白质编码的基因。
解答：
A．限制酶--识别并在特定位置切断DNA分子中的磷酸二酯键，A正确；
B．RNA聚合酶--与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录，B错误；
C．DNA连接酶--将分开的DNA片段通过特定末端连接在一起，形成磷酸二酯键，C正确；
D．DNA聚合酶--将单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成DNA单链，D正确。
故选B。
17．【答案】D
【解析】
试题分析：
诱变育种的原理是基因突变，杂交育种和基因工程育种的原理是基因重组。基因工程中常用的工具有限制酶．DNA连接酶和运载体。
解答：
A．诱变育种的遗传学原理是基因突变，A错误；
B．杂交育种可通过杂交→自交→选育→自交过程，获得双亲的优良遗传特性，但能集中双亲优良性状的育种方法不是只有杂交育种，还可能通过细胞工程获得，B错误；
C．基因工程育种所用的工具酶有限制酶和DNA连接酶，运载体不属于酶，C错误；
D．培育产胰岛素的大肠杆菌，方法是基因工程育种，依据的遗传学原理是基因重组，D正确。
故选D。
18．【答案】B
【解析】
试题分析：
细菌在含青霉素培养基上生长情况
细菌在含四环素培养基上生长情况
①
能生长
能生长
②
能生长
不能生长
③
不能生长
能生长
1．基因工程操作离不开三种工具，下列有关说法不正确的是（ ）
A．常用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒，从而获得互补的黏性末端
B．在三种工具中最常用载体——质粒的基本单位是脱氧核糖核苷酸，两种酶的基本单位是氨基酸
C．DNA聚合酶能够催化形成磷酸二酯键，是基因工程中的“分子缝合针”
D．限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力
2．用限制酶处理DNA片段，可使特定核苷酸序列特定部位的磷酸二酯键断开。若用X．Y两种限制酶作用于图中的DNA片段，并进行电泳分析，其结果如下图。 A~D选项中，关于两种酶的酶切位置的判断，正确的是（ ）
A．
B．
C．
D．
3．下列关于基因工程载体的叙述，不正确的是（ ）
A．可用自然质粒作为基因工程的载体B．有自我复制能力
C．对受体细胞无害D．可以是动植物病毒
4．有关限制性内切酶 Hind Ⅲ和 Xh I 的识别序列及切割位点分别为 A↓AGCTT 和C↓TCGAG，相关叙述正确的是（ ）
A．两种限制酶的识别序列在 DNA 分子中出现的概率不同
B．两种限制酶切割形成的粘性末端都是-AGCT
C．分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒
D．实验中可通过控制反应时间．酶的浓度等控制酶切效果
5．下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（ ）
A．基因工程又叫DNA拼接技术，所用的工具酶有限制酶和DNA聚合酶
B．所有的限制性酶识别同一种特定的核苷酸序列
C．只要目的基因进入了受体细胞就能成功的表达，不需要再进行检测
D．基因工程常用的运载体有噬菌体．动植物病毒和质粒
6．图甲表示某环型 DNA 分子经限制性内切核酸酶（EcRⅠ）完全酶切后的片段电泳结果。若改变条件使其酶 切不充分就有可能获得如图乙所示的电泳结果（kb 即千个碱基对）。下列叙述错误的是（ ）
A. 该 DNA 分子全长至少为 7 kb，该 DNA 分子中至少含有 4 个 EcRⅠ酶切位点
B. 适当缩短反应时间，得到图乙结果的可能性越大
C. 限制性内切核酸酶的化学本质都是蛋白质
D. 适当增加 EcRⅠ浓度，更可能得到图乙的结果
7．质粒是基因工程中常用的载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置（插入点有a．b．c），请根据表中提供的细菌生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因的插入点，正确的一组是（ ）
A．①是c；②是b；③是a
B．①是a和b；③是b
C．①是a和b；②是b；③是a
D．①是；②是a；③是b
8．下图表示三种限制酶BamHⅠ．BglⅡ和MbⅠ的识别序列和切割位点，下列叙述不正确的是（ ）
A．三种限制酶作用的化学键相同
B．三种限制酶切割DNA分子后能形成相同的黏性末端
C．能被BamHⅠ或BglⅡ切割的位点也能被MbⅠ切割
D．能被MbⅠ切割的位点一定能被BamHⅠ或BglⅡ切割
9．用 XhI 和 SalI 两种限制性核酸内切酶分别处理同一 DNA 片段，酶切位点及酶切产物分离结果 如图。以下叙述错误的是（ ）
A．不同限制性核酸内切酶区别就在于识别核苷酸序列的不同
B．如图中两种限制酶切割形成的粘性末端可能相同
C．泳道①中是用 SalI 处理得到的酶切产物
D．若用 XhI 和 SalI 两种酶同时处理该 DNA 片段后电泳，其泳道可能只有 5 条
10．用XhⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。下列叙述 正确的是（ ）
A．电泳是指不带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程
B．泳道①中是用XhI处理得到的酶切产物
C．图中两种酶识别的序列不同．酶切产物不可用于构建重组DNA
D．电泳技术可以用于人类亲子鉴定．生物间亲缘关系的鉴定
11．下列有关基因工程的叙述，错误的是（ ）
A．基因工程所用的工具酶是限制酶．DNA连接酶
B．DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来
C．利用基因工程技术，可以定向地改造生物的遗传性状
D．基因工程的实质是基因重组
12．下列有关基因工程中操作工具的叙述，正确的是（ ）
A．运载体的化学本质与载体蛋白相同
B．限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸
C．DNA连接酶可以催化脱氧核苷酸链间形成氢键
D．EcliDNA连接酶既可以“缝合”黏性末端，也可以“缝合”平末端
13．DNA连接酶是重组DNA技术中常用的一种工具酶。下列相关叙述，正确的是（ ）
A．能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键
B．能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键
C．能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键
D．只能连接双链DNA片段互补的黏性末端，不能连接双链DNA片段的平末端
14．下列关于DNA连接酶的叙述，不正确的是（ ）
A．制备重组DNA需要DNA连接酶
B．DNA连接酶按来源可分为E·cliDNA连接酶和T4DNA连接酶
C．T4DNA连接酶可连接双链DNA片段间的磷酸和核糖
D．E·cliDNA连接酶只能连接具有黏性末端的双链DNA片段
15．图（a）依次为EcR I．BalH I和Sau3A I三种限制酶识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体示意图，下列有关分析正确的是（ ）
A．DNA片段被BamH I．Sau3A I酶切后可形成不同的黏性末端
B．不能使用限制酶EcR I．BamH I获取目的基因
C．抗生素抗性基因可用于鉴别目的基因是否表达
D．使用限制酶EcR I．Sau3A I切割质粒可防止自身环化
16．下列各种酶及其作用对应关系不正确的是（ ）
A．限制酶—识别并在特定位置切断 DNA 分子中的磷酸二酯键
B．RNA 聚合酶—与基因的特定位点结合，催化遗传信息的翻译
C．DNA 连接酶—将分开的 DNA 片段通过特定末端连接在一起
D．DNA 聚合酶—将单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成 DNA 单链
17．关于生物育种的叙述，正确的是（ ）
A．诱变育种的遗传学原理是染色体结构变异
B．能集中双亲优良性状的育种方法只有杂交育种
C．基因工程育种所用的工具酶有限制酶．DNA连接酶和运载体
D．培育产胰岛素的大肠杆菌，依据的遗传学原理是基因重组
18．下列关于质粒的叙述，正确的是（ ）
A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器
B．质粒是细菌细胞中能够自主复制的小型环状DNA分子
C．质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制
D．细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的
参考答案与试题解析
1．【答案】C
【解析】
试题分析：
基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；
（3）运载体：常用的运载体：质粒．噬菌体的衍生物．动植物病毒。
解答：
A．构建基因表达载体时，常用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒，以产生相同的黏性末端，A正确；
B．在三种工具中最常用载体--质粒的化学本质是DNA，其基本单位是脱氧核糖核苷酸；两种酶的化学本质是蛋白质，其基本单位是氨基酸，B正确；
C．DNA连接酶能够催化形成磷酸二酯键，是基因工程中的“分子缝合针”，C错误；
D．限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力，即具有专一性，D正确。
故选C。
2．【答案】B
【解析】
试题分析：
分析示意图可知，X和Y酶酶切结果是获得长度为4500．3500．1500和500碱基对的片段，X酶酶切结果是获得长度6000．3500和500碱基对的片段，Y酶酶切结果是获得长度为8000．2000碱基对的DNA片段。
解答：
A．用X．Y两种限制酶作用于图中的DNA片段，得到的是4500．3500．1500和500碱基对的片段，用Y酶切割得到的是500和9500的片段，A错误；
B．用X．Y两种限制酶作用于图中的DNA片段，得到的是4500．3500．1500和500碱基对的片段，用X酶切割得到的是3500．6000．500的片段，用Y酶切割得到的是8000和2000的片段，B正确；
C．用Y酶切割得到的是1500和8500的片段，C错误；
D．用X酶切割得到的是500．5000和4500的片段，D错误。
故选B。
3．【答案】A
【解析】
试题分析：
载体指在基因工程中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。载体的选择需要满足如下条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因；③能够在宿主细胞中稳定存在并复制；④对受体细胞无害，且易从供体细胞中分离出来。
解答：
A．自然质粒可能不具备某些限制酶的切点，必须经过改造才能作为基因工程的载体，A错误；
B．作为基因工程的载体必须具有有自我复制能力，B正确；
C．对受体细胞无害是基因工程载体必备的特点，C正确；
D．基因工程的载体有质粒．动植物病毒和λ噬菌体衍生物，D正确。
故选A。
4．【答案】D
【解析】
由题可知，限制性内切酶HindⅢ和Xh I的识别序列刚好互补（AG与TC互补），因此两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率相同，A错误；HindⅢ切割形成的粘性末端是-AGCTT，而Xh I切割形成的粘性末端都是-TCGAG，B错误；两种限制酶切割形成的粘性末端不相同，不能互补，C错误；实验中可通过控制反应时间．酶的浓度等控制酶切效果，D正确。
5．【答案】D
【解析】
试题分析：
重组DNA技术所用的工具是限制性内切酶．连接酶和运载体．限制性内切酶具有特异性，能识别特定的核苷酸序列;基因工程成功率很小，在操作过程中要经常筛选,原核生物特点：繁殖快．多为单细胞．遗传物质相对较少等.
解答：
A．基因工程的工具酶包括限制酶和DNA连接酶， A错误；
B．限制性核酸内切酶具有特异性，一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列并在特定的位点进行切割，B错误；
C．目的基因进入受体细胞不一定能成功地实现表达，还需检测和鉴定，C错误；
D．基因工程常用的运载体有噬菌体．动植物病毒和质粒，D正确。
故选D。
6．【答案】D
【解析】题图分析：环型DNA分子经限制性核酸内切酶（EcRⅠ）完全酶切后得到4.0．1.5．1.0和0.5四种长度的DNA片段，说明该DNA分子全长至少为7Kb，至少含有4个EcRⅠ酶切位点；若改变条件使其酶 切不充分就有可能获得如图乙所示的电泳结果。结合图示可知，该环状DNA中四个酶切位点的距离依次为4kb．0.5kb．1.5kb．1kb。
A．环型DNA分子经限制性核酸内切酶（EcRⅠ）完全酶切后得到4.0．1.5．1.0和0.5四种长度的DNA片段，说明该DNA分子全长至少为7Kb；由于是环型DNA分子，被限制性核酸内切酶（EcRⅠ）完全酶切后得到至少4个DNA片段，说明该DNA分子中至少含有4个EcRⅠ酶切位点，A正确；
B．适当缩短反应时间，酶切不充分，得到图乙结果的可能性越大，B正确；
C．限制性核酸内切酶主要来自原核生物，化学本质都是蛋白质，C正确；
D．适当增加EcRⅠ浓度，DNA被切割更充分，更可能得到图甲的结果，D错误。
故选D。
7．【答案】A
【解析】
试题分析：
分析图形可知：
（1）a是抗氨苄青霉素基因，如果外源基因插入到a中，此基因结构被破坏，细菌无抗氨苄青霉素能力。将细菌放入含有氨苄青霉素培养基上生长，则会死亡；相反，会存活。
（2）b是抗四环素基因，如果外源基因插入到b中，抗四环素基因结构被破坏，细菌无抗四环素能力。将细菌放入含有四环素培养基上生长，则会死亡；相反，会存活。
解答：
第①组：细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因没有被破坏。由此可知，外源基因插入的位置不是a．b，而是c；
第②组：细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌不能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因被破坏。说明了外源基因插入位置是b，不是a；
第③组：细胞不能在含氨苄青霉素培养基上生长，能在含四环素培养基上的生长，说明抗氨苄青霉素基因被破坏，抗四环素基因没有被破坏，由此可知，外源基因插入的位置是a，而不是b。
故选A。
8．【答案】D
【解析】
试题分析：
一种限制酶只能识别一种特定的DNA序列，且只能在特定的位点切割。
解答：
A．三种限制酶作用的化学键均为磷酸二酯键，A正确；
B．三种限制酶切割产生的黏性末端均为GATC，B正确；
C．能被BamHⅠ或BglⅡ切割的位点一定含有GATC的序列，该序列可以被MbⅠ识别，故可以被其切割，C正确；
D．能被MbⅠ切割的位点不一定能被BamHⅠ或BglⅡ识别，故不一定能被其切割，D错误。
故选D。
9．【答案】A
【解析】
试题分析：
分析题图：限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物；限制酶XhⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhⅠ处理得到的酶切产物。
解答：
A．不同的限制酶识别并切割的核苷酸序列不同，形成的末端也可能不同，A错误；
B．用相同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端是一定相同的，用不同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端也可能是相同的，B正确；
C．限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物，C正确；
D．由题干信息：限制酶在对应切点一定能切开，可知用XhⅠ和SalⅠ同时处理该DNA电泳后得到6种产物，6种产物中有可能有两两相同长度的DNA片段，因此其泳道可能只有5条，D正确。
故选A。
10．【答案】D
【解析】
试题分析：
分析题图：限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物；限制酶XhⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhⅠ处理得到的酶切产物。
解答：
A．电泳是指带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程，A错误；
B．限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物，B错误；
C．不同的限制酶识别并切割的核苷酸序列不同，因此图1中两种酶识别的核苷酸序列不同，但是酶切产物可用于构建重组DNA ，C错误；
D．电泳技术可以用于人类亲子鉴定．生物间亲缘关系的鉴定，D正确。
故选D。
11．【答案】B
【解析】
试题分析：
基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）运载体：常用的运载体：质粒．噬菌体的衍生物．动植物病毒
解答：
A．由分析可知，基因工程所用的工具酶是限制酶．DNA连接酶，A正确；
B．DNA连接酶将黏性末端的磷酸二酯键连接起来，B错误；
C．利用基因工程技术，可以定向地改造生物的遗传性状，C正确；
D．基因工程的本质是基因重组，D正确。
故选B。
12．【答案】B
【解析】
试题分析：
限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
质粒是一种裸露的．结构简单．独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
DNA连接酶是在两个具有相同末端的DNA片段之间形成磷酸二酯键。
解答：
A．运载体的化学本质是环状的DNA，而细胞膜上载体的化学本质是蛋白质，A错误；
B．限制酶能识别并切割DNA分子，而烟草花叶病毒的遗传物质是RNA，B正确；
C．DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成磷酸二酯键，C错误；
D．EcliDNA连接酶只能“缝合”黏性末端，D错误。
故选B。
13．【答案】C
【解析】
试题分析：
DNA连接酶：（1）根据酶的来源不同分为两类：E．cliDNA连接酶．T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。
解答：
A．DNA连接酶连接的磷酸二酯键，A错误；
B．DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键，B错误；
C．能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键，C正确；
D．有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，D错误。
故选C。
14．【答案】C
【解析】
试题分析：
“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶（E·cliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：
①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·cliDNA连接酶来源大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
解答：
A．制备重组DNA需要将运载体与目的基因连接，要用到DNA连接酶，A正确；
B．DNA连接酶按来源可分为E·cliDNA连接酶和T4DNA连接酶，B正确；
C．T4DNA连接酶可连接双链DNA片段间的磷酸和脱氧核糖，C错误；
D．E·cliDNA连接酶只能连接具有黏性末端的双链DNA片段，D正确。
故选C。
15．【答案】D
【解析】
试题分析：
关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来；
（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；
（3）结果：形成黏性末端或平末端。
解答：
A．DNA片段被BamH I．Sau3A I酶切后可形成相同的黏性末端—GATC—，A错误；
B．由于不清楚目的基因的结构，所以不确定获得目的基因需要的限制酶，B错误；
C．抗生素抗性基因不能鉴别目的基因是否表达，可以供重组DNA的鉴定和选择，C错误；
D．使用不同的限制酶切割质粒可防止自身环化，D正确。
故选D。
16．【答案】B
【解析】
试题分析：
生物工程中酶的作用：
1．DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用，在基因工程中起作用。
2．DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起做用。
3．限制性核酸内切酶：从DNA链的内部进行切割，分为限制性内切酶和非限制性内切酶。
4．DNA修饰酶是指对DNA分子进行修饰的酶，目前基因工程中常用的酶有：碱性磷酸酶．末端转移酶．甲基化酶。
5．反转录酶：依赖于RNA的DNA聚合酶，既可以用DNA为模板，也可以用RNA为模板进行互补链的合成。基因工程中主要功能是利用真核mRNA为模板反转录cDNA，用来建立cDNA文库，进而分离为特定蛋白质编码的基因。
解答：
A．限制酶--识别并在特定位置切断DNA分子中的磷酸二酯键，A正确；
B．RNA聚合酶--与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录，B错误；
C．DNA连接酶--将分开的DNA片段通过特定末端连接在一起，形成磷酸二酯键，C正确；
D．DNA聚合酶--将单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成DNA单链，D正确。
故选B。
17．【答案】D
【解析】
试题分析：
诱变育种的原理是基因突变，杂交育种和基因工程育种的原理是基因重组。基因工程中常用的工具有限制酶．DNA连接酶和运载体。
解答：
A．诱变育种的遗传学原理是基因突变，A错误；
B．杂交育种可通过杂交→自交→选育→自交过程，获得双亲的优良遗传特性，但能集中双亲优良性状的育种方法不是只有杂交育种，还可能通过细胞工程获得，B错误；
C．基因工程育种所用的工具酶有限制酶和DNA连接酶，运载体不属于酶，C错误；
D．培育产胰岛素的大肠杆菌，方法是基因工程育种，依据的遗传学原理是基因重组，D正确。
故选D。
18．【答案】B
【解析】
试题分析：
细菌在含青霉素培养基上生长情况
细菌在含四环素培养基上生长情况
①
能生长
能生长
②
能生长
不能生长
③
不能生长
能生长
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