高三生物复习学案：专题8 生物技术实践专题

这是一份高三生物复习学案：专题8 生物技术实践专题，共20页。学案主要包含了互动探究1，互动探究2，互动探究3，互动探究4等内容，欢迎下载使用。

考点整合一：微生物的培养及应用
培养基种类及用途
2．无菌技术（消毒和灭菌的区别）
3.统计菌落数目的方法
（1）稀释涂布平板法（也叫活菌计数法）
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少个活菌。
②操作：
A．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取0.1 mL接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布棒将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下培养，计算菌落数。为使结果接近真实值，可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板上，经涂布、培养，计算出菌落平均数。
B．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300个的平板进行计数，若设置的重复组中结果相差太远，意味着操作有误，需重新实验。
③计算公式：每个样品中的菌＝ ，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
说明：此种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
（2）显微镜直接计数法
①原理：此法利用特定细菌计数板或血球计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量，但不能区分细菌的死活。计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积（1 mm2）和高（0.1 mm）的计数室，在1 mm2的面积里又被划分成25个（或16个）中格，每个中格进一步划分成16个（或者25个）小格，但计数室都是由400个小格组成。
②操作：将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再将稀释的样品滴在计数板上，然后在显微镜下统计4～5个中格中的细菌数，并求出每个小格所含细菌的平均数，再按下面公式求出每毫升样品中所含的细菌数。
③计算公式：每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400×10000×稀释倍数。
（3）滤膜法：以测定饮用水中大肠杆菌的数目为例，将已知体积的水过滤后，将滤膜放于伊红—美蓝培养基上培养，在该培养基上，大肠杆菌菌落呈现深紫色，可根据培养基上深紫色的菌落数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。
【例1】 （2009·宁夏理综、辽宁理综）（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、_________________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能___________________________________________________________________
温度
酸碱度
易培养
生活周期短
灭菌
消毒
损伤DNA的结构
（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。
（4）通常对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_____________。
（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________
______________________________________________________________________________________________。
（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
比例合适
鉴定（或分类）
将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生
灭菌
[解析] 微生物的培养要有适宜的营养物质（碳源、氮源、生长因子等）、温度、pH、渗透压（控制培养液的浓度）等。细菌具有个体微小、结构简单、生长周期短、繁殖快、代谢旺盛、变异类型简单（主要是基因突变）等特点。在微生物实验操作中，防止杂菌污染是贯穿实验整个过程中的内容，因此，对环境、生物材料、操作者双手等进行消毒，对培养基、接种环和培养仪器进行灭菌。紫外线灭菌的原理是紫外线使蛋白质和DNA等生物分子变性，即空间结构改变。
稀释涂布平板法是细菌分离纯化的常用方法，合理的稀释倍数是实验的关键。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，依据菌落大小、形态、色泽等可以对细菌进行鉴定或分类。因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠道出现严重症状，所以使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散
知识拓展
微生物的纯化培养（两种接种方法）
平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。
稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
【互动探究1】 （2010·苏州模拟）同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：
（1）简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：__________________________________________________________________________________________________。
（2）培养基中加入尿素的目的是筛选________，这种培养基属于________培养基。
在以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH增高，使酚红指示剂变为红色
目的菌
选择
（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_______________，实验需要振荡培养，原因是______________________________________。
（4）转为固体培养时，常采用_______________________接种，获得单菌落后继续筛选。
尿素、葡萄糖
为目的菌提供氧气
涂布平板法（或划线法）
[解析] 选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制其他微生物的生长，促进所需微生物的生长，筛选目的菌可用选择培养基。尿素是培养基中的惟一氮源，因此只有能够利用尿素的微生物才能够生长。由于细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH增高，故在以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂，其将变红；目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的尿素、葡萄糖。
考点整合二：生物技术在食品加工中的应用
1．果酒和果醋制作的比较
2.腐乳的制作
（1）实验原理：多种微生物发酵，豆腐中的蛋白质、脂肪被分解为肽和氨基酸、甘油和脂肪酸等。
（2）实验流程：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。
（3）操作注意事项：①控制好材料的用量：盐的浓度不能过低或过高，卤汤中酒的含量应控制在12%左右；②防止杂菌的污染。
3．制作泡菜并检测亚硝酸盐含量
（1）实验原理：①利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐含量的变化；②在酸性条件下，亚硝酸盐通过显色反应，与已知浓度的标准液对比，可以估算泡菜中亚硝酸盐的含量。
（2）实验流程
4．水蒸气蒸馏法、压榨法、有机溶剂萃取法的比较
【例2】 （2009·海南卷）请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题：
（1）植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、________和________。
（2）芳香油溶解性的特点是不溶于________，易溶于________，因此可用__________________________作为提取剂来提取芳香油。
（3）橘子果实含有芳香油，通常可用________作为材料提取芳香油，而且提取时往往选用新鲜的材料，理由是________________________________________________________________________。
蒸馏法
萃取法
水
有机溶剂
有机溶剂（其他合理答案也可）
橘子皮
芳香油含量较高
（4）对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中的固体物获得乳状液可采用的方法是________________________________________________________________________。
（5）得到的乳状液加入氯化钠并放置一段时间后，芳香油将分布于液体的________层，原因是________________________________________________________________________，
加入氯化钠的作用是________________________________________________________________________。
过滤（其他合理答案也可）
上
油层的密度比水层小（其他合理答案也可）
增加水层密度，使油和水分层
（6）从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水硫酸钠，此剂的作用是________________________________________________________________________。
吸收芳香油中残留的水分
[解析] 本题考查芳香油的提取方法、原理、材料选择及依据压榨法提取的主要操作方法和目的等。（1）植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、蒸馏法和萃取法等。（2）芳香油溶解性的特点是不溶于水，易溶于有机溶剂，因此可用有机溶剂作为提取剂来提取芳香油。（3）一般采用新鲜的橘皮来提取橘皮精油，因为新鲜的橘皮中芳香油含量较高。（4）除去液体中的固体常用方法是过滤。（5）芳香油密度比水小，且不溶于水，会浮在液体的表面。加入氯化钠会增加水层密度，使油和水分层。（6）无水硫酸钠的作用是吸收芳香油中残留的水分。
【互动探究2】 （2010·海南模拟）腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵的大豆食品，下面是腐乳制作的流程示意图：
（1）现代科学研究表明，许多种微生物参与了豆腐的发酵，比如________、________、________和毛霉等。其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种________状真菌，分布广泛，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上。毛霉生长迅速，具有发达的白色菌丝。
（2）腐乳制作的原理是___________________________________________________________________________________________________。
青霉
酵母
曲霉
丝
毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸
（3）传统的制作过程中，豆腐块上生长的毛霉来自__________________________。而现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样做的目的是________________________________________________________________________。
空气中的毛霉孢子
避免其他菌种的污染，保证产品质量
（4）加盐的作用是________________________________________________________________________。
（5）卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右。加酒的作用是________________________________________________________________________
析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，抑制微生物的生长，避免豆腐变质
抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味
考点整合三：酶的研究与应用
1．酶的活性及影响酶活性因素的实验探究（以果胶酶在生产中的应用为例探究温度或pH对果胶酶活性的影响）
（1）探究不同温度（或pH）对酶活性的影响时，温度（或pH）作为自变量，通常通过设置合理的梯度来确定最适值，最适值是通过比较相同时间内获得的产量或效果来确定的。
（2）在混合苹果泥和果胶酶之前，要将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温（或同pH），处理的目的是保证底物和酶在混合时的温度（或pH）相同，避免果泥与果胶酶混合时影响混合物的温度（或pH），从而影响果胶酶的活性。
（3）通过测定滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的原理是：果胶酶将果胶分解为小分子物质，小分子物质可以通过滤纸，因此苹果汁的体积大小反映了果胶酶催化分解果胶的能力。在不同的温度和pH下，果胶酶的活性越大，苹果汁的体积就越大。
2．探究不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果
（1）实验原理：加酶洗衣粉的酶制剂有多种，包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶等。加入不同的酶制剂，会制成用于不同污渍洗涤的加酶洗衣粉。复合酶洗衣粉加入的酶制剂种类较多，对各种污渍都有较好的洗涤效果。
（2）实验操作程序
3.固定化酶和固定化细胞的比较
【例3】 （2010·临沂模拟）某工厂生产了一种加酶洗衣粉，其包装袋上印有如下说明：
成分：含碱性蛋白酶等。
用法：洗涤前先将衣服浸于洗衣粉水内数小时。使用温水效果最佳。
注意：切勿用于丝质及羊毛衣料。用后彻底清洗双手。
请回答下列问题：
（1）质检局针对该洗衣粉设计了如下图所示装置进行实验：
该实验的目的是________________________________________________________________________。
检查该洗衣粉是否含蛋白酶 1
（2）一学生为探索该洗衣粉中酶催化作用的最适温度，参考上述（1）的实验材料及方法进行了如下实验，并把结果用曲线图A．B表示如下：
①由图可知，使用该加酶洗衣粉的最适温度约为_________________________________________________。
②在0℃和75℃时，酶的催化效率基本都降为零，但温度再度回到45℃，后者的催化作用已不能恢复，这是因为________________________________________________________________________。
③该学生在实验过程中可通过观察___________________________________________现象来判断酶的催化效率。
45℃
酶的活性已丧失
胶片上的蛋白膜消失时间的长短
（3）该加酶洗衣粉的去污原理是_______________________________________________________________________________________________。
（4）大力推广使用加酶洗衣粉代替含磷洗衣粉，有利于生态环境保护，这是因为________________________________________________________________________。
（5）除加酶外，很多洗衣粉中还加有香精，高档洗衣粉中的香精都是由植物芳香油制成的，目前从植物中提取芳香油的方法有________、________等。（写出两种）
用蛋白酶分解衣服中的污垢，所含的蛋白质变为易分解的小分子，使之易被洗去
酶本身无毒，含量少，又能被微生物分解，不会引起富营养化，对环境无污染
萃取法
蒸馏法
[解析] 本题以生活中常用的加酶洗衣粉为实验材料，进行有关酶方面的问题研究。实验的变量是酶的有无，影响的条件主要是温度，涉及到的内容还有环境问题。通过此题体现了“观察现象→提出问题→设计实验步骤→分析结果→得出结论”的探究途径。
【互动探究3】 （2010·江苏卷）为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果，将一种无酶洗衣粉分成3等份，进行3组实验。甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍，其他实验条件均相同，下表为实验记录。
请回答下列问题。
（1）提高洗衣粉去污能力的方法有________________________。甲组在洗衣粉中加入了____________。乙组在洗衣粉中加入了_________________________。
（2）甲、乙组洗涤效果的差异，说明酶的作用具有________。
（3）如果甲、乙和丙3组均在水温为80℃时洗涤同一种污渍，请比较这3组洗涤效果之间的差异并说明理由____________________________________________________
加酶和适当提高温度
蛋白酶
蛋白酶和脂肪酶
专一性
没有差异，因为高温使酶失活
（4）加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化学物质包裹的，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用。请说明这是否运用了酶的固定化技术及其理由________________________________________________________________________________________
未运用酶的固定化技术，因为酶未固定在不溶于水的载体上，也不能重复利用
[解析] 本题考查考生解读表格的能力和运用所给信息处理相关问题的能力。（1）根据所给信息，提高洗衣粉去污能力的方法有加酶和适当提高温度。血渍中含有血红蛋白，油渍中主要成分是脂肪，根据甲、乙两组去除血渍和油渍的能力比较，能够得出甲组加入了蛋白酶，乙组加入了蛋白酶和脂肪酶。（2）加入的酶的种类不同，洗涤效果有差异，充分体现了酶的专一性。（3）酶在高温的情况下会变性失活，因此甲、乙、丙三组在水温为80 ℃时，效果一样。（4）固定化酶的优点是可以重复利用，酶的固定化技术是把酶固定在不溶于水的载体上。
考点整合四：生物技术在其他方面的应用
1．DNA的粗提取与鉴定
（1）材料准备：本实验用鸡血细胞作实验材料有两个原因：①鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得；②鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长。
（2）DNA的粗提取和鉴定
2.血红蛋白的提取
（1）凝胶色谱法：根据相对分子质量的大小分离蛋白质。
（2）电泳技术：在电场的作用下，利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。
（3）蛋白质的提取和分离
3.生物体内DNA复制与PCR反应的区别
4.花粉植株的产生与植物茎的组织培养的比较
【例4】 （2009·山东理综）人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如图：
请回答：
（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行________。接种前，要对人参根进行________。
（2）用于离体培养的根切块，叫做________。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于________污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于________污染。
（3）用少量________酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。
灭菌
消毒
外植体
真菌（霉菌）
细菌
果胶
（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用____________方法，操作时应采用________加热。
萃取（浸取）
水浴
[解析] 本题以植物组织培养为材料背景考查了植物组织培养过程中涉及的培养基消毒、灭菌的相关的知识及污染后的菌落特征的比较。同时考查了关于物质的提取和鉴定的内容，跨度较大，考查的知识面较广。（1）接种前，要对材料进行消毒，配制的培养基分装后要进行高压蒸汽灭菌。（2）比较菌落特征。真菌污染：有颜色的绒毛状菌落；细菌污染：有光泽的黏液状菌落。
（3）植物细胞胞间层的组成成分是果胶，利用果胶酶处理愈伤组织可以获得单个的细胞。（4）植物有效成分的提取常采用萃取法、蒸馏法和压榨法。人参皂苷易溶于亲水性有机溶液，故而采用有机溶剂萃取的方法从培养物干粉中提取人参皂苷。
【互动探究4】 （2010·泰州模拟）对血红蛋白（Hb）的研究结果表明，血红蛋白实际上是由珠蛋白、原卟啉和二价铁离子（Fe2＋）所组成的结合蛋白质，由4条肽链各结合一个辅基即血红素，O2结合于Fe2＋上，血红蛋白与氧疏松结合形成氧合血红蛋白（HbO2），这种氧合作用在氧分压高时容易进行，在氧分压低时易于解离。红细胞结合和携带O2的过程并不影响二价铁离子，也就是说不会使之氧化为三价铁离子。Fe3＋无携带O2的能力。CO与Hb的亲和力大于O2，结合成HbCO后不能重新分离，致使Hb丧失运输O2和CO2的机能，此称为一氧化碳中毒，即煤气中毒。
根据以上资料，回答下列问题：
（1）用凝胶色谱法分离血红蛋白时，待________接近色谱柱底端时，才用试管收集。血红蛋白因含________而呈现红色。
（2）要使血红蛋白从红细胞中释放出来，可选用的方法是
________________________________________________________________________。
（3）红细胞具有运输氧的功能，是因为________________________________________________________________________。
红色区带
血红素
将红细胞置于蒸馏水中，加40%体积的甲苯，并搅拌使之破裂
红细胞中的血红蛋白与氧在氧分压高时容易结合，在氧分压低时又容易分离
（4）亚硝酸盐为强氧化剂，进入人体后，可使血红蛋白失去运输氧的功能，导致组织缺氧，其可能的原因是_____________________________________________________________________
亚硝酸盐可使血中低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白
高考链接
1.（2010·江苏卷，7）如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是
A．过程①和②都只能发生在缺氧条件下
B．过程①和③都发生在酵母细胞的线粒体中
C．过程③和④都需要氧气的参与
D．过程①～④所需的最适温度基本相同
答案：C
解析：本题以流程图为载体，综合考查果酒和果醋的制作过程及有氧呼吸与无氧呼吸的过程的相关知识，意在考查考生对所学知识的综合应用与分析能力。据图分析可知：①是细胞呼吸的第一阶段；②是无氧呼吸的第二阶段；③是有氧呼吸的第二、第三阶段；④是果醋制作中乙醇氧化为醋酸的阶段。①过程在有氧或无氧的条件下都可以进行，故A项错误；①过程是在细胞质基质中进行的，故B项错误；③和④都必须在有氧的条件下才可以进行，故C项正确；①、②、③是果酒制作的阶段，其适宜的温度为18℃～25℃，④是果醋制作的阶段，其适宜的温度为30℃～35℃，故D项错误。
2．（2010·上海卷，25）如图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，下列叙述不正确的是
A．刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液
B．图1中X溶液为CaCl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠
C．图2发酵过程中搅拌的目的是使培养液与酵母菌充分接触
D．图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中
答案：A
解析：本题考查固定化细胞技术的基础知识，意在考查考生对固定化酵母细胞实验操作的掌握情况。在该实验中，将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，再加入已活化的酵母细胞，否则高温会导致酵母细胞死亡；实验中氯化钙溶液的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠；固定好的酵母细胞（凝胶珠）用蒸馏水冲洗2～3次，再将其转移至10%的葡萄糖溶液中，并用搅拌器搅拌，目的是使培养液与固定化酵母细胞充分接触，有利于发酵的正常进行。
3．（2010·新课标全国卷，39）下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：
（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有__________________________________的性质。蒸馏时收集的蒸馏液_______________（是、不是）纯的玫瑰精油，原因是_____________________________________________________________________________________________________________________________________
易挥发、难溶于水、化学性质稳定
不是
玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物
（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和________。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是
________________________________________________________________________。
蒸馏温度
在一定的时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后提取量不再增加
（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会________，原因是________________________________________________________________________。
（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度________的地方，目的是________________________________________________________________________。
（5）某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为________天左右。
下降
部分精油会随水蒸气挥发而流失
较低
减少挥发
a
（6）从薄荷叶中提取薄荷油时________（能、不能）采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________。
能
薄荷油与玫瑰精油的化学性质相似
解析：本题考查选修1模块中植物芳香油提取的相关知识，意在考查考生将理论知识与实践相结合的能力和识图分析能力。（1）水蒸气蒸馏法的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。玫瑰精油具有易挥发、难溶于水、化学性质稳定等性质，故适合用水蒸气蒸馏法提取，收集的蒸馏液为油水混合物。（2）蒸馏时许多因素都会影响产品的品质，如蒸馏温度、时间等。在一定范围内随着蒸馏时间的延长，精油的提取量会增加，但因原料量等条件一定，故超过一定时间后，提取量不再增加。
（3）蒸馏过程中要进行冷却，让混合物重新分出油层和水层。若不冷却则会有部分玫瑰精油随水蒸气挥发而流失，使精油提取量下降。（4）因玫瑰精油易挥发，故密封不严的瓶装玫瑰精油应存放在温度较低的地方，以减少玫瑰精油的挥发。（5）提取精油时采摘花的最适时间为花中精油的相对含量最高的时间，即a天左右。（6）因薄荷油与玫瑰精油的化学性质相似，易挥发、难溶于水等，故也可用与玫瑰精油相同的方法提取。
划分
标准
培养基种类
特点
途径
物理
液体培养基
不加凝固剂
工业生产
半固体
培养基
加凝固剂，如琼脂
观察微生物的运动、分类鉴定
固体培养基
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
化学
成分
天然培养基
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
合成培养基
培养基成分明确（用化学成分已知的化学物质配成）
分类、鉴定
用途
选择培养基
培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长
培养、分离出特定微生物（如培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌时，可在培养基中加入高浓度的食盐）
鉴别培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品
鉴别不同种类的微生物，如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）
项目
消毒
灭菌
条件
使用较为温和的理化方法
使用强烈的理化因素
结果
杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）
杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
适用
实验操作的空间、操作者的衣服和手
微生物的培养器皿、接种用具和培养基等
常用
方法
煮沸消毒法（如在100℃，煮沸5～6 min）、巴氏消毒法（如在80℃，煮15 min）；使用酒精、氯气、石炭酸等化学药剂进行消毒
灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
KH2PO4
1.4 g
Na2HPO4
2.1 g
MgSO4·7H2O
0.2 g
葡萄糖
10 g
尿素
1 g
琼脂
15 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000 mL
提取方法
实验原理
方法步骤
适用范围
水蒸气
蒸馏法
利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来
①水蒸气蒸馏；
②分离油层；
③除水过滤
适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油
压榨法
通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油
①石灰水浸泡、漂洗；②压榨、过滤、静置；③再次过滤
适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取
有机溶
剂萃取
使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油
①粉碎、干燥；
②萃取、过滤；
③浓缩
适用范围广，要求原料的颗粒尽可能细小，能充分浸泡在有机溶剂中
步骤
烧杯编号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
注入自来水
500 mL
500 mL
500 mL
加入物质
（等量）
奶渍布
奶渍布
奶渍布
控制水温
37℃
37℃
37℃
加入洗衣粉
（等量）
蛋白酶洗衣粉
复合酶洗衣粉
脂肪酶洗衣粉
观察实现现象
项目
固定化酶
固定化细胞
常用方法
化学结合法、物理吸附法
包埋法
优点
①可反复使用；②有利于工艺的连续化、管道化，同时降低了生产成本
①可以连续发酵，节约成本；②保持酶在细胞内的原始状况，增加了酶的稳定性；③操作容易
不足
①酶在固定化时活力有所损失；②不适用于多酶反应
细胞膜、细胞壁会阻碍底物的渗透和扩散，降低反应效率
水温/℃
10
20
30
40
50
组别
甲
乙
丙
甲
乙
丙
甲
乙
丙
甲
乙
丙
甲
乙
丙
清除血渍
时间/min
67
66
88
52
51
83
36
34
77
11
12
68
9
11
67
清除油渍
时间/min
93
78
95
87
63
91
82
46
85
75
27
77
69
8
68
步骤
操作
原理
破碎细胞，
释放DNA
加入20 mL蒸馏水，搅拌5 min，用1～2层纱布过滤备用
使细胞吸水胀破
溶解细
胞核中
的DNA
加入2 ml/L的氯化钠溶液40 mL，搅拌1 min
DNA在高浓度氯化钠溶液中，溶解度最大
DNA的
析出
加入蒸馏水约300 mL，不停地进行均匀搅拌，然后用3～4层纱布过滤混合液
降低氯化钠浓度，使DNA的溶解度降到最低
DNA
的初步
提纯
加入2 ml/L的氯化钠溶液20 mL，不停地搅拌，然后用2层纱布过滤混合液
DNA的
再次
提纯
加入95%冷酒精50 mL，然后进行搅拌
浓缩沉淀DNA
DNA的
鉴定
向两支试管中分别加入4 mL二苯胺试剂，然后将试管在沸水浴中加热5 min，比较试管中的颜色变化。注：二苯胺溶液要现用现配，否则会影响鉴定效果
沸水浴中DNA遇二苯胺试剂呈蓝色
步骤
操作
样品处理
通过红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液等操作收集到血红蛋白溶液
粗分离
通过透析法去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小的杂质
纯化
通过凝胶色谱法分离相对分子质量不同的蛋白质
项目
体内复制
PCR反应
解旋
在解旋酶作用下，细胞提供能量，部分解开
加热至90℃，双链全部解开，不需解旋酶
引物
一小段RNA
可以是RNA或单链DNA分子片段
合成
子链
在引物基础上，一条链连续合成，另一条链不连续合成
分别从两条链的引物端开始，都是连续合成，控制温度72℃
特点
边解旋边复制；半保留复制
体外迅速扩增
Taq DNA
聚合酶
不需要
需要
循环
次数
受生物体自身控制
30多次
相同点
生物体内的DNA复制和PCR体外DNA扩增都需要模板、四种脱氧核苷酸，且都需要在一定的缓冲溶液中进行
项目
菊花茎的组织培养
月季的花药培养
理论依据
细胞的全能性
基本过程
脱分化、再分化
影响因素
选材、营养、激素、pH、温度、光照等
选材、营养、激素、pH、温度等
操作流程
制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培
选材→材料消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育