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江西省南昌市第一中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题（Word版附答案）
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这是一份江西省南昌市第一中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题（Word版附答案），共10页。试卷主要包含了单项选择题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
一、单项选择题（本题共12个小题，每小题2分，共24分）
1．我国古代最早酿造葡萄酒采用的是将葡萄破碎成浆的自然发酵酿酒法，后来出现了向葡萄汁中加入“曲蘖”的酿造方法。下列叙述正确的是（ ）
A．用于自然发酵酿酒法的葡萄可先去皮，有利于破碎成浆
B．葡萄汁中加入的“曲蘖”含有酵母菌，可加快酒精发酵
C．酿造葡萄酒需使用密闭性较好的容器，定期打开盖子放气
D．若发酵产物变酸，可能是容器密闭不严，酵母菌进行了有氧呼吸
2．微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。如图为酵母菌的纯培养的部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A．完成步骤④的过程中，接种环共灼烧处理了5次
B．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的
C．该接种方法可用于获得酵母菌的纯培养物
D．接种后，待菌液被培养基吸收，将④倒置培养，皿盖上标注菌种及接种日期等信息
3．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（ ）
A．某一稀释度下至少涂3个平板，以减小实验误差
B．3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×107个
D．该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用
4．摇摆式间歇浸没生物反应器通过摆动架的倾斜摆动，使培养液周期性间歇浸没组培苗，实现组培苗的快速生长。相关叙述正确是（ ）
A．获得组织苗的培养基含有水、无机盐、蔗糖、琼脂和激素等多种营养物质
B．获得组培苗的步骤：外植体→脱分化形成胚状体→再分化形成试管苗
C．间歇摆动提高培养液溶氧量，有利于组培苗进行有氧呼吸，提高生长速度
D．经过间歇浸没培养获得的植株需要消毒后炼苗再移栽到经灭菌处理的土壤中
5．临床上常对羊水中胎儿脱落的细胞进行染色体分析，得出染色体数量以及结构变异的重要信息，辅助医生产前诊断。具体操作步骤如下图所示，下列选项中说法错误的是（ ）
A．秋水仙素处理可抑制纺锤体的形成，便于进行染色体分析
B．实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察
C．细胞培养过程中需适时更换培养液，防止代谢产物积累过多危害细胞生长
D．利用该技术能够检测镰状细胞贫血、唐氏综合征等染色体异常遗传病
6．双特异性抗体是指同时具有两种抗原结合位点的人造抗体，研究人员用新的技术构建了一种双特异性抗体，该抗体可同时特异性识别肝癌细胞上的GPC-3以及T淋巴细胞表面的特殊蛋白质CD3。下图表示该双特异性抗体的制备过程，下列相关叙述错误的是（ ）
A．图1中过程②可使用灭活的病毒诱导细胞融合，此方法也可用于诱导植物体细胞融合
B．HAT培养基会抑制单个的骨髓瘤细胞和骨髓瘤-骨髓瘤细胞的增殖，而B淋巴细胞分裂能力弱，只有杂交瘤细胞可以正常增殖
C．由图2可知，该双特异性抗体可同时识别肝癌细胞膜上的GPC-3和T淋巴细胞膜上的CD3，从而将肝癌细胞和T淋巴细胞紧密接近（将T细胞定向带到癌细胞所在的位置），有利于T淋巴细胞特异性地杀伤肝癌细胞，促使巨噬细胞吞噬肝癌细胞
D．培养淋巴细胞时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期更换培养液，提供的气体环境应为95%的空气和5%的CO2
7．将取自一个胚胎的胚胎干细胞(ES)注射到发育中的另一个胚胎内，可发育形成拥有不同基因型细胞的嵌合体。2023年，中国科学家培育出世界上首只高比例胚胎干细胞“嵌合食蟹猴”，其多种组织中含有供体干细胞来源的细胞。下列叙述错误的是（ ）
A．胚胎干细胞存在于早期胚胎中，有形成个体的潜能
B．供体ES在受体胚胎内可分化出成体干细胞
C．诱导多能干细胞可作为供体ES的“替代品”培育嵌合体
D．受体胚胎接受移植的最佳时机是发育至原肠胚阶段
8．下列有关基因工程说法中，错误的是（ ）
A．基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向地改造生物，培育出新品种
B．质粒常作为基因工程的载体，是存在于细菌和酵母菌等生物细胞中的一种细胞器
C．细菌细胞内的基因可在植物细胞内表达是因为所有生物共用一套密码子
D．对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制
9．大肠杆菌经溶菌酶和阴离子去垢剂（SDS）处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中。利用上述原理可初步获得质粒DNA。下列关于质粒的粗提取和鉴定的分析错误的是（ ）
A．DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精，可以用冷酒精析出上清液中的DNA
B．DNA能溶于2ml/L的NaCl溶液，可用二苯胺试剂在沸水加热条件下鉴定DNA
C．用限制酶I和Ⅱ处理提取的产物，电泳出现图结果，说明未提取到质粒
D．用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒，被染色的质粒还需要通过紫外灯照射才能看到结果
10．HIV感染是引起艾滋病的原因。利用进入抑制剂阻止HIV进入靶细胞是阻止 HIV感染的重要途径。研究者按照如图所示的途径构建了一种可视化的、无感染性的进入抑制剂检测模型。下列说法正确的是（ ）
A．env蛋白是介导HIV侵染靶细胞的重要蛋白
B．进入抑制剂通过破坏env蛋白结构阻止HIV侵染
C．通过测定融合细胞中env表达量判定进入抑制剂的效果
D．进行上述系统操作的实验员有感染HIV的风险
11．甲、乙、丙三名同学分别以酵母菌为材料进行PCR扩增，再取20ul扩增产物进行凝胶电泳，结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A．PCR反应需要脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶和解旋酶等
B．PCR以DNA半保留复制为原理，子链的延伸方向为5’→3’
C．甲同学扩增得到DNA分子的数量比乙同学多
D．丙同学所用的引物可能与甲乙同学不一样
12．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列说法正确的是（ ）
A．重组 DNA 技术所用的工具酶是限制酶、DNA 连接酶和运载体
B．只有用同种限制酶切割 DNA 产生的黏性末端才能互补
C．用图中质粒和外源基因 DNA 构建重组质粒，可使用 SmaⅠ切割
D．使用 EcRⅠ同时处理质粒和外源 DNA，可能会发生质粒或者目的基因的自身环化
二、多项选择题（本题共4个小题，每小题4分，少选得2分，多选或错选得0分，共16分）
13．自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是 ( )
A．步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍
B．自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数
C．步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中
D．步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源
14．柑橘花叶病毒（CiMV）能引起柑橘果皮出现各种绿色花纹，使其商业价值下降。CiMV 外壳蛋白中 11-475 残基（485taa）的肽具有较强的免疫原性。为及早发现并消除受感染的树木，研究人员利用动物细胞工程技术开发了一种针对 CiMV 的灵敏且快速的兔源性单克隆抗体（mAb）诊断试剂盒。下列说法正确的是（ ）
A．制备 mAb 过程中，需用 CiMV 的 485aa 对实验兔进行多次免疫处理
B．可用 PEG 处理已免疫的 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，促使二者融合
C．经选择培养后的杂交瘤细胞在体外扩大培养可以获得大量 mAb
D．该诊断试剂盒利用了 mAb 与 CiMV 的 485aa 特异性结合的原理
15．利用农杆菌转化法可将抗虫基因导入玉米细胞而获得抗虫植株。下列说法正确的是 ( )
A．若对已知序列的抗虫基因进行大量扩增，应用PCR技术
B．将重组的农杆菌Ti质粒喷洒到玉米伤口上，可成功转化
C．利用害虫接种实验可从分子水平检测目的基因是否进入了玉米细胞
D．将抗虫基因导入细胞质可避免通过花粉传播进入其他植物
16．科学家将鼠抗人大肠癌单克隆抗体基因（ND-1） 与酵母胞嘧啶脱氨酶基因（CD） 融合，在大肠杆菌中成功地表达了单链抗体与酶的融合蛋白，这类蛋白的疗法称为由抗体介导的酶解前药疗法 （ADEPT）。ND-1—CD融合基因的构建方法如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．图中两条杂交链的获得至少需要经过2次扩增循环
B．图中杂交链延伸生成ND-1——CD 融合基因的过程应不用加入引物
C．获得的融合基因在构建好基因表达载体后可直接被正常状态的大肠杆菌吸收
D．该融合蛋白应是利用抗体部分特异性的识别人大肠癌细胞并将酶带到靶部位
三、非选择题（本题共5个小题，共60分）
17.（除注明外，每空1分，共10分）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。
（1）若根据用途划分，该培养基属于 培养基。制备固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、 ；培养基中蛋白胨的作用主要是为微生物生长提供 （2分）等营养物质。
（2）在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行 ；操作者的双手需要进行清洗和 。
（ 3）图中图 1 和图 2 是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是： 和 ，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的 。
（4）以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有 。
A．制作果酒 B．由果酒制作果醋
C．制作泡菜 D．制作腐乳
18．（每空2分，共12分）HER2 是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，HER2 过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗 HER2 过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗 HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。回答下列问题：
(1)在制备抗 HER2-ADC的过程中，需要用 对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。过程②和③分别表示筛选出 、 。
(2)抗 HER2-ADC作为靶向药杀伤HER2 过度表达的恶性肿瘤细胞的效果较为明显，其原因是
。
(3)为研究抗 HER2-ADC 对 HER2 过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗——美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。
①将乳腺癌细胞 BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到 200 mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射 ，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。
②实验结果表明，抗 HER2-ADC 对 BT-474 细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好。
③后续可通过研究抗 HER2-ADC 等情况，为抗 HER2-ADC 进入临床实验奠定数据基础。
19．（除注明外，每空2分，共8分）线粒体中某基因突变可引发莱氏综合征（Leigh Syndrme）。医学工作者用来自卵子捐献者的健康线粒体取代了母亲卵子中的缺陷线粒体，随后用父亲的精子使融合后的卵子受精，诞生出世界首位“三亲婴儿”。下图为“三亲婴儿”技术路线示意图，回答下列问题：
(1)该技术涉及 等操作（至少答两项）。
(2)在促使捐献者及母亲超数排卵时，不宜长期过量使用性激素的原因是
。
(3)图示重组卵母细胞应培养至 （时期）（1分），才具备与精子受精的能力，人工授精前需对精子进行 （1分）处理。
(4)“三亲婴儿”技术被认为可能有助于治疗某些不明原因的不孕不育症，并提高体外受精的成功率。医学工作者提出另一种“三亲婴儿”的技术路线：先 ，然后将其细胞核转移到另一个细胞核已提前被移除的卵母细胞中。这样的受精卵也有三个遗传学亲本，并且不携带母亲的致病线粒体DNA。
20．（每空2分，共14分）淀粉液化是淀粉加工业中的一个重要工艺，传统的方法是加入外源耐高温α淀粉酶，工艺复杂且成本较高。现通过基因工程技术将地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因转入马铃薯，直接获得含有耐高温α淀粉酶的淀粉类原料，从而简化工艺，降低成本。回答下列问题：
（1）筛选具有耐高温α-淀粉酶基因的地衣芽孢杆菌，可将菌种接种至富含淀粉的LB培养基，在 条件下培养一段时间，向培养基表面滴加碘液，选取透明圈较大的菌落。
（2）图1为耐高温α-淀粉酶基因，请根据图中给出的部分碱基序列设计PCR扩增该基因的引物，引物序列分别为 、 （标明3'端和5'端）。除引物、耐高温的DNA聚合酶等，PCR的缓冲溶液中一般要添加Mg2+，其作用是 。
（3）将目的基因导入马铃薯可用农杆菌转化法，图2为构建表达载体所用Ti质粒，根据基因表达载体的结构组成分析，“X”应为 。目的基因应插入Ti质粒的 ，因为 。
21．（每空2分，共16分）通过基因工程技术由大肠杆菌合成的人生长激素可用于治疗缺乏生长激素的垂体性侏儒症病人。如图1为通过基因工程技术生产人生长激素的过程。请回答下列问题：
（1）图1中①过程中可从人的垂体细胞中提取到生长激素mRNA的原因是
，②过程为 ，该过程存在的碱基互补配对方式有 （填序号：a.A—T；b.U—A；c.G—C）。
（2）图1中的A为生长激素基因，利用PCR将一个A扩增3次，共需要引物 个。PCR扩增后的产物可采用 法来鉴定。
（3）⑤过程可以先用 处理大肠杆菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态。
（4）图2为图1中B的结构示意图，由图2分析可知，若要成功构建基因表达载体，需要在A的上游和下游分别添加 、 （选填图2中限制酶）的识别位点（假设A的内部不存在相关限制酶的识别位点）。
南昌一中2023-2024学年度下学期高二期中考试
生物答案
1—5：BCCCD6—10：ADBCA 11—12：AD
13：ACD 14：ABD 15：AD 16：ABD
17.（除注明外，每空1分，共10分）
（1）鉴别；倒平板；碳源和氮源 （2分）
（2）灭菌；消毒
（3）稀释涂布平板法；平板划线法；菌落
（4）BC
18.（每空2分，共12分）
(1)HER2 杂交瘤细胞 分泌抗 HER2 抗体的杂交瘤细胞
(2)HER2过度表达的恶性肿瘤细胞表面的 HER2 多，与抗 HER2-ADC 结合的概率高
(3)等剂量的磷酸缓冲液 在动物体内的代谢、对正常细胞的毒性
19.（除注明外，每空2分，共8分）
(1)动物细胞培养、动物细胞核移植、胚胎移植、早期胚胎培养等
(2)长期过量使用的性激素会通过负反馈调节，导致性腺萎缩
(3) MII（1分） 获能（1分）
(4)先让父母双方的生殖细胞完成受精过程，产生受精卵
20.（每空2分，共14分）
(1)高温
(2)5'ATCCGTGGCTG3'、5'CTACGGATTCA3' 激活DNA聚合酶
(3)启动子 T-DNA T-DNA可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上。
21.（每空2分，共16分）
(1)人的生长激素基因在垂体细胞中选择性表达 逆转录 abc
(2) 14 琼脂糖凝胶电泳
(3)Ca2+
(4) AluI HindⅡ
成分
蛋白胨
乳糖
蔗糖
K2HPO4
指示剂
琼脂
含量（g）
10．0
5．0
5．0
2．0
0．2
12．0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1 000 mL
一、单项选择题（本题共12个小题，每小题2分，共24分）
1．我国古代最早酿造葡萄酒采用的是将葡萄破碎成浆的自然发酵酿酒法，后来出现了向葡萄汁中加入“曲蘖”的酿造方法。下列叙述正确的是（ ）
A．用于自然发酵酿酒法的葡萄可先去皮，有利于破碎成浆
B．葡萄汁中加入的“曲蘖”含有酵母菌，可加快酒精发酵
C．酿造葡萄酒需使用密闭性较好的容器，定期打开盖子放气
D．若发酵产物变酸，可能是容器密闭不严，酵母菌进行了有氧呼吸
2．微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。如图为酵母菌的纯培养的部分操作步骤，下列说法正确的是（ ）
A．完成步骤④的过程中，接种环共灼烧处理了5次
B．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的
C．该接种方法可用于获得酵母菌的纯培养物
D．接种后，待菌液被培养基吸收，将④倒置培养，皿盖上标注菌种及接种日期等信息
3．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（ ）
A．某一稀释度下至少涂3个平板，以减小实验误差
B．3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×107个
D．该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用
4．摇摆式间歇浸没生物反应器通过摆动架的倾斜摆动，使培养液周期性间歇浸没组培苗，实现组培苗的快速生长。相关叙述正确是（ ）
A．获得组织苗的培养基含有水、无机盐、蔗糖、琼脂和激素等多种营养物质
B．获得组培苗的步骤：外植体→脱分化形成胚状体→再分化形成试管苗
C．间歇摆动提高培养液溶氧量，有利于组培苗进行有氧呼吸，提高生长速度
D．经过间歇浸没培养获得的植株需要消毒后炼苗再移栽到经灭菌处理的土壤中
5．临床上常对羊水中胎儿脱落的细胞进行染色体分析，得出染色体数量以及结构变异的重要信息，辅助医生产前诊断。具体操作步骤如下图所示，下列选项中说法错误的是（ ）
A．秋水仙素处理可抑制纺锤体的形成，便于进行染色体分析
B．实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察
C．细胞培养过程中需适时更换培养液，防止代谢产物积累过多危害细胞生长
D．利用该技术能够检测镰状细胞贫血、唐氏综合征等染色体异常遗传病
6．双特异性抗体是指同时具有两种抗原结合位点的人造抗体，研究人员用新的技术构建了一种双特异性抗体，该抗体可同时特异性识别肝癌细胞上的GPC-3以及T淋巴细胞表面的特殊蛋白质CD3。下图表示该双特异性抗体的制备过程，下列相关叙述错误的是（ ）
A．图1中过程②可使用灭活的病毒诱导细胞融合，此方法也可用于诱导植物体细胞融合
B．HAT培养基会抑制单个的骨髓瘤细胞和骨髓瘤-骨髓瘤细胞的增殖，而B淋巴细胞分裂能力弱，只有杂交瘤细胞可以正常增殖
C．由图2可知，该双特异性抗体可同时识别肝癌细胞膜上的GPC-3和T淋巴细胞膜上的CD3，从而将肝癌细胞和T淋巴细胞紧密接近（将T细胞定向带到癌细胞所在的位置），有利于T淋巴细胞特异性地杀伤肝癌细胞，促使巨噬细胞吞噬肝癌细胞
D．培养淋巴细胞时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期更换培养液，提供的气体环境应为95%的空气和5%的CO2
7．将取自一个胚胎的胚胎干细胞(ES)注射到发育中的另一个胚胎内，可发育形成拥有不同基因型细胞的嵌合体。2023年，中国科学家培育出世界上首只高比例胚胎干细胞“嵌合食蟹猴”，其多种组织中含有供体干细胞来源的细胞。下列叙述错误的是（ ）
A．胚胎干细胞存在于早期胚胎中，有形成个体的潜能
B．供体ES在受体胚胎内可分化出成体干细胞
C．诱导多能干细胞可作为供体ES的“替代品”培育嵌合体
D．受体胚胎接受移植的最佳时机是发育至原肠胚阶段
8．下列有关基因工程说法中，错误的是（ ）
A．基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向地改造生物，培育出新品种
B．质粒常作为基因工程的载体，是存在于细菌和酵母菌等生物细胞中的一种细胞器
C．细菌细胞内的基因可在植物细胞内表达是因为所有生物共用一套密码子
D．对于基因工程或分子生物学实验室向外排放转基因细菌等必须严加管制
9．大肠杆菌经溶菌酶和阴离子去垢剂（SDS）处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中。利用上述原理可初步获得质粒DNA。下列关于质粒的粗提取和鉴定的分析错误的是（ ）
A．DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精，可以用冷酒精析出上清液中的DNA
B．DNA能溶于2ml/L的NaCl溶液，可用二苯胺试剂在沸水加热条件下鉴定DNA
C．用限制酶I和Ⅱ处理提取的产物，电泳出现图结果，说明未提取到质粒
D．用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒，被染色的质粒还需要通过紫外灯照射才能看到结果
10．HIV感染是引起艾滋病的原因。利用进入抑制剂阻止HIV进入靶细胞是阻止 HIV感染的重要途径。研究者按照如图所示的途径构建了一种可视化的、无感染性的进入抑制剂检测模型。下列说法正确的是（ ）
A．env蛋白是介导HIV侵染靶细胞的重要蛋白
B．进入抑制剂通过破坏env蛋白结构阻止HIV侵染
C．通过测定融合细胞中env表达量判定进入抑制剂的效果
D．进行上述系统操作的实验员有感染HIV的风险
11．甲、乙、丙三名同学分别以酵母菌为材料进行PCR扩增，再取20ul扩增产物进行凝胶电泳，结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A．PCR反应需要脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶和解旋酶等
B．PCR以DNA半保留复制为原理，子链的延伸方向为5’→3’
C．甲同学扩增得到DNA分子的数量比乙同学多
D．丙同学所用的引物可能与甲乙同学不一样
12．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列说法正确的是（ ）
A．重组 DNA 技术所用的工具酶是限制酶、DNA 连接酶和运载体
B．只有用同种限制酶切割 DNA 产生的黏性末端才能互补
C．用图中质粒和外源基因 DNA 构建重组质粒，可使用 SmaⅠ切割
D．使用 EcRⅠ同时处理质粒和外源 DNA，可能会发生质粒或者目的基因的自身环化
二、多项选择题（本题共4个小题，每小题4分，少选得2分，多选或错选得0分，共16分）
13．自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是 ( )
A．步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍
B．自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数
C．步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中
D．步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源
14．柑橘花叶病毒（CiMV）能引起柑橘果皮出现各种绿色花纹，使其商业价值下降。CiMV 外壳蛋白中 11-475 残基（485taa）的肽具有较强的免疫原性。为及早发现并消除受感染的树木，研究人员利用动物细胞工程技术开发了一种针对 CiMV 的灵敏且快速的兔源性单克隆抗体（mAb）诊断试剂盒。下列说法正确的是（ ）
A．制备 mAb 过程中，需用 CiMV 的 485aa 对实验兔进行多次免疫处理
B．可用 PEG 处理已免疫的 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，促使二者融合
C．经选择培养后的杂交瘤细胞在体外扩大培养可以获得大量 mAb
D．该诊断试剂盒利用了 mAb 与 CiMV 的 485aa 特异性结合的原理
15．利用农杆菌转化法可将抗虫基因导入玉米细胞而获得抗虫植株。下列说法正确的是 ( )
A．若对已知序列的抗虫基因进行大量扩增，应用PCR技术
B．将重组的农杆菌Ti质粒喷洒到玉米伤口上，可成功转化
C．利用害虫接种实验可从分子水平检测目的基因是否进入了玉米细胞
D．将抗虫基因导入细胞质可避免通过花粉传播进入其他植物
16．科学家将鼠抗人大肠癌单克隆抗体基因（ND-1） 与酵母胞嘧啶脱氨酶基因（CD） 融合，在大肠杆菌中成功地表达了单链抗体与酶的融合蛋白，这类蛋白的疗法称为由抗体介导的酶解前药疗法 （ADEPT）。ND-1—CD融合基因的构建方法如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．图中两条杂交链的获得至少需要经过2次扩增循环
B．图中杂交链延伸生成ND-1——CD 融合基因的过程应不用加入引物
C．获得的融合基因在构建好基因表达载体后可直接被正常状态的大肠杆菌吸收
D．该融合蛋白应是利用抗体部分特异性的识别人大肠癌细胞并将酶带到靶部位
三、非选择题（本题共5个小题，共60分）
17.（除注明外，每空1分，共10分）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。
（1）若根据用途划分，该培养基属于 培养基。制备固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、 ；培养基中蛋白胨的作用主要是为微生物生长提供 （2分）等营养物质。
（2）在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行 ；操作者的双手需要进行清洗和 。
（ 3）图中图 1 和图 2 是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是： 和 ，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的 。
（4）以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有 。
A．制作果酒 B．由果酒制作果醋
C．制作泡菜 D．制作腐乳
18．（每空2分，共12分）HER2 是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，HER2 过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗 HER2 过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗 HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。回答下列问题：
(1)在制备抗 HER2-ADC的过程中，需要用 对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。过程②和③分别表示筛选出 、 。
(2)抗 HER2-ADC作为靶向药杀伤HER2 过度表达的恶性肿瘤细胞的效果较为明显，其原因是
。
(3)为研究抗 HER2-ADC 对 HER2 过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗——美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。
①将乳腺癌细胞 BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到 200 mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射 ，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。
②实验结果表明，抗 HER2-ADC 对 BT-474 细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好。
③后续可通过研究抗 HER2-ADC 等情况，为抗 HER2-ADC 进入临床实验奠定数据基础。
19．（除注明外，每空2分，共8分）线粒体中某基因突变可引发莱氏综合征（Leigh Syndrme）。医学工作者用来自卵子捐献者的健康线粒体取代了母亲卵子中的缺陷线粒体，随后用父亲的精子使融合后的卵子受精，诞生出世界首位“三亲婴儿”。下图为“三亲婴儿”技术路线示意图，回答下列问题：
(1)该技术涉及 等操作（至少答两项）。
(2)在促使捐献者及母亲超数排卵时，不宜长期过量使用性激素的原因是
。
(3)图示重组卵母细胞应培养至 （时期）（1分），才具备与精子受精的能力，人工授精前需对精子进行 （1分）处理。
(4)“三亲婴儿”技术被认为可能有助于治疗某些不明原因的不孕不育症，并提高体外受精的成功率。医学工作者提出另一种“三亲婴儿”的技术路线：先 ，然后将其细胞核转移到另一个细胞核已提前被移除的卵母细胞中。这样的受精卵也有三个遗传学亲本，并且不携带母亲的致病线粒体DNA。
20．（每空2分，共14分）淀粉液化是淀粉加工业中的一个重要工艺，传统的方法是加入外源耐高温α淀粉酶，工艺复杂且成本较高。现通过基因工程技术将地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因转入马铃薯，直接获得含有耐高温α淀粉酶的淀粉类原料，从而简化工艺，降低成本。回答下列问题：
（1）筛选具有耐高温α-淀粉酶基因的地衣芽孢杆菌，可将菌种接种至富含淀粉的LB培养基，在 条件下培养一段时间，向培养基表面滴加碘液，选取透明圈较大的菌落。
（2）图1为耐高温α-淀粉酶基因，请根据图中给出的部分碱基序列设计PCR扩增该基因的引物，引物序列分别为 、 （标明3'端和5'端）。除引物、耐高温的DNA聚合酶等，PCR的缓冲溶液中一般要添加Mg2+，其作用是 。
（3）将目的基因导入马铃薯可用农杆菌转化法，图2为构建表达载体所用Ti质粒，根据基因表达载体的结构组成分析，“X”应为 。目的基因应插入Ti质粒的 ，因为 。
21．（每空2分，共16分）通过基因工程技术由大肠杆菌合成的人生长激素可用于治疗缺乏生长激素的垂体性侏儒症病人。如图1为通过基因工程技术生产人生长激素的过程。请回答下列问题：
（1）图1中①过程中可从人的垂体细胞中提取到生长激素mRNA的原因是
，②过程为 ，该过程存在的碱基互补配对方式有 （填序号：a.A—T；b.U—A；c.G—C）。
（2）图1中的A为生长激素基因，利用PCR将一个A扩增3次，共需要引物 个。PCR扩增后的产物可采用 法来鉴定。
（3）⑤过程可以先用 处理大肠杆菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态。
（4）图2为图1中B的结构示意图，由图2分析可知，若要成功构建基因表达载体，需要在A的上游和下游分别添加 、 （选填图2中限制酶）的识别位点（假设A的内部不存在相关限制酶的识别位点）。
南昌一中2023-2024学年度下学期高二期中考试
生物答案
1—5：BCCCD6—10：ADBCA 11—12：AD
13：ACD 14：ABD 15：AD 16：ABD
17.（除注明外，每空1分，共10分）
（1）鉴别；倒平板；碳源和氮源 （2分）
（2）灭菌；消毒
（3）稀释涂布平板法；平板划线法；菌落
（4）BC
18.（每空2分，共12分）
(1)HER2 杂交瘤细胞 分泌抗 HER2 抗体的杂交瘤细胞
(2)HER2过度表达的恶性肿瘤细胞表面的 HER2 多，与抗 HER2-ADC 结合的概率高
(3)等剂量的磷酸缓冲液 在动物体内的代谢、对正常细胞的毒性
19.（除注明外，每空2分，共8分）
(1)动物细胞培养、动物细胞核移植、胚胎移植、早期胚胎培养等
(2)长期过量使用的性激素会通过负反馈调节，导致性腺萎缩
(3) MII（1分） 获能（1分）
(4)先让父母双方的生殖细胞完成受精过程，产生受精卵
20.（每空2分，共14分）
(1)高温
(2)5'ATCCGTGGCTG3'、5'CTACGGATTCA3' 激活DNA聚合酶
(3)启动子 T-DNA T-DNA可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上。
21.（每空2分，共16分）
(1)人的生长激素基因在垂体细胞中选择性表达 逆转录 abc
(2) 14 琼脂糖凝胶电泳
(3)Ca2+
(4) AluI HindⅡ
成分
蛋白胨
乳糖
蔗糖
K2HPO4
指示剂
琼脂
含量（g）
10．0
5．0
5．0
2．0
0．2
12．0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1 000 mL
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