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山东省潍坊市安丘市2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题（原卷版+解析版）
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1. 蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（ ）
A. 发酵过程中的菌种不需要专门接种，先清洗后去梗是为了较少杂菌污染
B. 过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵为蓝莓醋
C. 过程③、④中主要发酵菌种的细胞结构不同，后者在过程⑤中已经失去了发酵能力
D. 过程④⑤的发酵条件不同，过程④所需的最适温度高于过程⑤
2. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。某科研团队拟从含盐量高的餐厨垃圾渗沥液处理系统中筛选分离出PHA合成能力较强的耐盐菌株，流程图如下。下列说法错误的是（ ）
（注：乙培养基中加入尼罗红，尼罗红是细胞内储存的脂类物质的荧光染色剂，在紫外光的照射下可显示红色。）
A. 配制甲培养基时可适当提高培养基的盐浓度，接种后应置于摇床中振荡培养
B. 接种前，为检测培养基是否灭菌彻底，应先将空白培养基培养一段时间
C. ①过程是扩大培养，②过程中应挑选有红色荧光的菌落进行培养
D. 可用诱变或基因工程方法选育PHA合成能力更强的耐盐菌株
3. 在微生物培养的过程中，需要通过选择培养或鉴别培养的方法来筛选出目标菌种，下列与之相关的叙述中不正确的是
A. 纤维素分解菌能够分解刚果红染料，从而使菌落周围出现透明圈
B. 尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而使酚红指示剂变红
C. 在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性菌株
D. 在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”
4. 下列关于发酵工程及其应用的说法，错误的是（ ）
A. 发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，要严格控制发酵条件
B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在主发酵阶段完成
C. 微生物农药利用微生物或其代谢物来防治病虫害，是生物防治的重要手段
D. 通过发酵获得大量微生物菌体，从菌体中提取的单细胞蛋白可作为动物饲料
5. 研究发现，生长素能够维持拟南芥bZIP59蛋白的稳定性，并增强其与LBD形成复合物的能力，bZIP59－LBD复合体直接靶向FAD－BD基因，并促进其转录，这有助于愈伤组织的形成。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 生长素通过调控植物细胞的基因表达而影响植物细胞全能性的表达
B. 植物自养型生物，培养基中不需要添加有机碳源
C. 培养基中添加激素的种类和含量会影响植物细胞发育的方向
D. 脱分化期间一般不需要光照，再分化时需要适当光照诱导叶绿素产生
6. 三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A. ①过程可利用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成
B. ②过程通常在低渗溶液中采用PEG融合法诱导原生质体融合
C. 杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，但结构不变
D. 图中所示的生产流程体现了细胞膜的流动性，但未体现植物细胞的全能性
7. 草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列说法正确的是（ ）
A. 需要用体积分数70%的酒精和质量分数5%次氯酸钠溶液对甲进行灭菌
B. 需要用不同的方法对两种选育方式的效果进行鉴定
C. 植物组织培养过程中，更容易受到培养条件和诱变因素的影响而产生定向突变
D. 方法一中选择甲作为组织培养材料的原因是该部位细胞的分生能力强
8. 科学家将C-Myc（原癌基因）、KI4（抑癌基因）、Sx2和Oct4等四种关键基因利用病毒转入高度分化的小鼠成纤维细胞内，获得iPS细胞，iPS细胞在适当的诱导条件下，可以定向分化成各种细胞。下列说法错误的是（ ）
A. 转入c-MyC、KIf4、Sx2和Oct4等的作用是诱导已分化细胞转变为未分化细胞
B. iPS细胞的分化程度与胚胎干细胞最接近
C. 在培养过程中，iPS细胞分裂生长到细胞表面相互接触时需要进行传代培养
D. 由题干可知所运用的病毒需要进行灭活处理
9. 尼帕病毒是一种新型人兽共患病毒（RNA病毒），能引起广泛的血管炎，感染者有发热、严重头痛、脑膜炎等症状，给人及动物带来严重危害。科研人员以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，实验流程如图所示，已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 可用聚乙二醇或灭活的病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合
B. 两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是AABB、AA、BB
C. 筛选1过程中未融合的细胞和同种细胞核融合的细胞会死亡
D. 筛选2为对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测
10. 研究发现；细胞膜上的转铁蛋白受体（TfR）与转铁蛋白（Tf）结合，可将铁元素运输至胞内。肿瘤细胞内铁元素浓度远高于正常细胞。科学家利用单克隆抗体技术，研制出鼠源性抗TfR抗体，可用于治疗小鼠肿瘤。下列说法错误的是（ ）
A. 肿瘤细胞表面TfR的表达量多于正常细胞
B. 抗TfR抗体通过阻止Tf与TfR的结合来抑制铁元素的摄取，抑制肿瘤细胞增长
C. 制备单克隆抗体时需给小鼠接种TfR，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞
D. 经特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞可直接注射到小鼠腹腔内增殖
11. 一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗 p72 的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（ ）
A. 注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大
B. 单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合
C. 利用该小鼠只能制备出一种抗 p72 的单抗
D. p72 部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
12. 科学家将大熊猫的体细胞和兔子的去核卵母细胞构建成重组细胞，使重组细胞成功发育为囊胚，标志着异种核质相容问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”。下列说法错误的是（ ）
A. 获取卵母细胞前，用含促性腺激素的饲料饲喂兔子可使其超数排卵
B. 可通过梯度离心法去除兔子卵母细胞中的细胞核
C. 可将大熊猫的体细胞直接注入兔子的去核卵母细胞
D. 选用的去核卵母细胞中的细胞质已成熟，可支持重组细胞发育成胚胎
13. “DNA粗提取与鉴定”的实验步骤是：研磨→去杂质→析出→鉴定：某研究小组欲探究不同的去杂质方法对实验结果的影响，实验结果如下表所示。下列说法错误的是（ ）
（注：OD260与OD280的比值可检查DNA纯度。纯DNA的OD260/OD280为1.8，当存在蛋白质污染时，这一比值会明显降低）
A. 猪肝和菜花均可作为提取DNA的材料
B. 对研磨液进行离心是为了加速DNA的沉淀
C. 离心法可以获得更高纯度的DNA
D. 析出时的离心转速明显高于去杂质时
14. 斑点印迹杂交是一种简单的DNA分子杂交技术，其技术流程如图。据此分析，下列说法正确的是（ ）
A. 放射性自显影技术可显示原培养皿中含目的基因的菌落位置
B. p和q片段能够杂交的主要原因是两单链的碱基排列顺序相同
C. p和q片段的杂交双链区域形成过程中有氢键和磷酸二酯键生成
D. 斑点印迹杂交技术可用于检测目的基因是否在受体细胞中成功表达
15. 目的基因和载体如果用同一种限制酶处理，连接时会出现正反接的情况，为鉴定筛选出的表达载体中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR后，结合电泳技术鉴定，图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因为长度300bp的片断。下列有关说法不正确的是（ ）
A. PCR退火温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链
B. 电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关
C. 选取引物甲丙，扩增出450bp长度片断时，可以说明目的基因正接
D. 选取引物甲乙，扩增出400bp长度片断时，可以说明目的基因反接
二、不定项项选择题（共5小题，每题3分）
16. 厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质，易腐烂变质，滋生病原微生物等。若处理不当，可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比的探究实验，并得出下图的实验结果。下面叙述错误的是（ ）
A. 巨大芽孢杆菌生长过程中需要氮源，圆褐固氮菌生长过程中不需要氮源
B. 要统计活菌数量可采用平板划线法和稀释涂布平板法
C. 将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36.据此可得出每升菌液中的活菌数为3.9×107
D. 处理该类厨余垃圾废液，两菌种的最佳接种量比为1：1
17. 某科研小组以感染菊花矮化类病毒（CSVd）的菊花品种“寒小白”为实验材料，研究不同培养方式对茎尖诱导分化成活率和脱毒效果的影响，结果如下表，下图是对不同试管苗进行RT-PCR（逆转录PCR）后的电泳示意图（引物根据CSVd的基因序列设计），下列说法错误的是（ ）
A. 实验中所用茎尖大小与茎尖诱导成活率正相关，与脱毒效果反相关
B. 试管苗2、5尚未脱毒成功，3、4已成功脱去CSVd病毒
C. RT-PCR技术中用到的酶有逆转录酶、DNA连接酶、热稳定DNA聚合酶
D. 热处理结合茎尖培养和病毒唑结合茎尖培养的脱毒率均优于单独的茎尖分生组织培养
18. 抗生素I-IV均可治疗黄色葡萄球菌（Sau）引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 配制培养基时应将培养基的pH调至微酸性
B. 测量菌落和抑菌圈直径时应直接在皿盖上测量
C. 抗生素IV治疗Sau感染引起的肺炎效果最好
D. 抑菌圈中出现的菌落可能是Sau发生了基因突变
19. 从中国仓鼠卵巢组织分离、培养的CHO细胞是生物制品领域最主要的生产细胞，广泛应用于各种药物蛋白的生产和基因工程。CHO细胞可以在培养基中高密度生长，能够分泌胞外蛋白且自身的分泌蛋白比较少。重组新冠病毒疫苗是将新冠病毒S蛋白受体结合区（RBD）基因通过基因工程技术，重组到中国仓鼠卵巢（CHO）细胞内，在体外培养并大量表达出RBD二聚体的方法。下列说法正确的是（ ）
A. CHO细胞作为新冠病毒的宿主细胞，提供病毒所需的营养物质
B. 与培养普通动物细胞相比，CHO细胞两次分瓶之间的间隔时间较短
C. 与大肠杆菌相比，CHO细胞表达的外源蛋白与天然蛋白更加相似，后期蛋白质的纯化更容易
D. CHO细胞能够表达出RBD二聚体，说明新冠病毒与仓鼠的遗传物质相同
20. OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法转化棉花，在棉花叶绿体内构建了一条新的代谢途径，提高了棉花的产量。下列叙述错误的是（ ）
A. 四个基因都在棉花叶绿体内进行转录、翻译
B. OsGLO1、EcCAT基因转录时以DNA的不同单链为模板
C. 应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的棉花细胞
D. 若转基因棉花的产量提高则可确定四个基因在棉花中成功表达
三、非选择题（共5题）
21. 某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了随机取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下：
请分析并回答下列问题：
（1）该实验中含有琼脂的培养基从物理性质来说，属于_______培养基，从功能上来说，属于____培养基，琼脂在培养基中的作用是_______。
（2）该培养基中只选择了_______作为唯一氮源。氮源在菌体内可以参与合成_______（答出2种即可）等生物大分子。
（3）琼脂培养基灭菌后，倒入培养皿中，冷凝后倒置，从而获得平板培养基，倒置的原因是_______。
（4）分解尿素的细菌能产生________酶，将尿素分解为_______。
（5）在稀释涂布平板法可对微生物进行计数的原理是________。
（6）实验结果：6号试管涂布的三个平板的菌落数为550、501、688，7号试管涂布的三个平板的菌落数为58、73、97，8号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28.该10g土壤样品中含有分解尿素的细菌的估算数目是_______个。该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目________。
22. 花椰菜（2n=18）易受黑腐病菌的危害，叶片表面出现黄色病斑，背部出现灰白色轮廓不分明的病斑，密生灰白色霉层，严重影响生长，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。科研人员用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株，流程如下图。据图回答下列问题：
（1）过程①所用的酶是_________。
（2）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的______，从而维持原生质体的形态和活性。细胞融合完成的标志是________的再生。
（3）经过②操作后，需筛选出融合的杂种细胞，显微镜下观察融合的活细胞中有黑芥叶肉细胞的_________（填写细胞器名称）存在，可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（4）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1~4中一定是杂种植株的有_______。
（5）进一步检测获得的杂种植株的染色体条数，结果如表，除了紫外线处理使黑芥原生质体染色体片段化导致染色体条数改变以外，杂种植株染色体条数在24-34范围内不等的原因可能是_________。
杂种植株染色体数目
（6）最后需通过实验验证杂交植株是否培育成功，依据危害特点简要写出思路_____。
23. 我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请据图分析回答：
（1）获得食蟹猴体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是_____。
（2）进行过程①时，细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_____，且在进行细胞原代培养时会出现_____现象。
（3）研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如下图所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是_____。
（4）科研人员发现对于灵长类动物的体细胞来说，单靠核移植本身并不足以使重构胚顺利发育成存活个体，还需要对供体细胞核进行表观遗传修饰才能开启细胞核的全能性。研究表明染色体组蛋白动态可逆地被修饰酶所改变，控制着基因的表达（如图所示）。
①据图分析，（ ）组蛋白乙酰化水平和（ ）组蛋白去甲基化水平有利于相关基因恢复表达，开启细胞核全能性，从而显著提高重构胚的发育率。括号内应填入的选项是_____。
A．提高；提高 B．降低；降低 C．提高；降低 D．降低；提高
②科研人员通过设计实验验证以上观点。供选择试剂为：组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、生理盐水。
实验思路：将重构胚均分为甲、乙、丙、丁四组，分别注入等量的组蛋白去乙酰化酶抑制剂、_____、_____、等量生理盐水。一段时间后分别检测各组的胚胎发育率。
实验结果：各组的胚胎发育率丙组>甲组=乙组>丁组。
24. 牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原菌，它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白，在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体，并进行相关研究。
（1）将等量的纯化VspX蛋白作为_________分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗VspX抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。
（2）在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是_________。然后取小鼠的脾脏细胞用_________试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到_________。该细胞具有_________的特点。
（3）一段时间后，将（2）所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如下图。
①在检测时需要将VspX蛋白固定于固相载体表面制成固相抗原，并加入多孔板培养槽中_________（细胞、上清液），即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将________洗去。
③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表_______。
（4）将上述细胞经胰蛋白酶处理，制成细胞悬液，置于二氧化碳培养箱中进行扩大培养，提取抗VspX单克隆抗体与不同抗原进行杂交检测，结果如下图
依据图的实验结果表明抗VspX单克隆抗体不能与________结合（图中数字），具有很强的特异性，可用于后续关于牛支原体所引发相关疾病的________等方面的研究。
25. 无核葡萄品质优良，但抗寒性差。我国科学家以中国野生葡萄资源中抗寒性最强的山葡萄为材料，对抗寒相关Va基因的功能展开相关研究。
（1）通过前期研究结果，科研人员推测Va基因可能为转录因子。转录因子是一类特定的蛋白，可以调控______与启动子的结合。
（2）为进一步验证Va基因转录激活功能，科研人员利用pG载体首先构建了重组质粒，导入到敲除GAL4基因的酵母AH109菌株中，如下图所示。GAL4基因可编码酵母中具有转录激活功能的蛋白，AH109菌株为色氨酸、组氨酸缺陷型菌株，只有在添加相应氨基酸的培养基中才能生长。
①为了能够筛选得到重组酵母，培养基的配方为下列选项中的_____组，此外还需额外添加______，通过显色反应做进一步验证。
②完善实验过程及对应结果______
（3）利用本地不抗寒葡萄品种“红地球”进一步探究Va基因的功能，科研人员构建了含Va基因和抗除草剂基因的稳定表达载体，用________法进行转染。请选择正确的后续实验操作并进行排序____。
A．72小时室温培养
B．72小时低温诱导培养
C．用PCR方法筛选出Va基因阳性植株
D．检测植株中Va蛋白的含量
E．用不含组氨酸的培养基筛选愈伤组织
F．用含除草剂的培养基筛选愈伤组织去杂质方式
沉淀质量（g）
DNA浓度（ng/μL）
OD260/OD280
二苯胺鉴定
离心
0.068
81.5
1.53
蓝色
4℃冰箱静置
0.1028
3364
1.41
处理方法
样本存活数
CSVd脱毒率
长度<0.3mm的茎尖分生组织培养
6
59.78
长度0.3-0.7mm的茎尖分生组织培养
75
22.6
长度0.7-1.0mm的茎尖分生组织培养
90
6
热处理结合茎尖培养
71
36.62
病毒唑结合茎尖培养
71
46.48
材料
染色体数
花椰菜
18
黑芥
16
杂种植株
28
杂种植株
26
杂种植株
30
杂种植株
24
杂种植株
34
A组：加色氨酸和组氨酸 B组：不加色氨酸和组氨酸
C组：加组氨酸，不加色氨酸 D组：加色氨酸，不加组氨酸
1. 蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（ ）
A. 发酵过程中的菌种不需要专门接种，先清洗后去梗是为了较少杂菌污染
B. 过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵为蓝莓醋
C. 过程③、④中主要发酵菌种的细胞结构不同，后者在过程⑤中已经失去了发酵能力
D. 过程④⑤的发酵条件不同，过程④所需的最适温度高于过程⑤
2. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。某科研团队拟从含盐量高的餐厨垃圾渗沥液处理系统中筛选分离出PHA合成能力较强的耐盐菌株，流程图如下。下列说法错误的是（ ）
（注：乙培养基中加入尼罗红，尼罗红是细胞内储存的脂类物质的荧光染色剂，在紫外光的照射下可显示红色。）
A. 配制甲培养基时可适当提高培养基的盐浓度，接种后应置于摇床中振荡培养
B. 接种前，为检测培养基是否灭菌彻底，应先将空白培养基培养一段时间
C. ①过程是扩大培养，②过程中应挑选有红色荧光的菌落进行培养
D. 可用诱变或基因工程方法选育PHA合成能力更强的耐盐菌株
3. 在微生物培养的过程中，需要通过选择培养或鉴别培养的方法来筛选出目标菌种，下列与之相关的叙述中不正确的是
A. 纤维素分解菌能够分解刚果红染料，从而使菌落周围出现透明圈
B. 尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而使酚红指示剂变红
C. 在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性菌株
D. 在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”
4. 下列关于发酵工程及其应用的说法，错误的是（ ）
A. 发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，要严格控制发酵条件
B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在主发酵阶段完成
C. 微生物农药利用微生物或其代谢物来防治病虫害，是生物防治的重要手段
D. 通过发酵获得大量微生物菌体，从菌体中提取的单细胞蛋白可作为动物饲料
5. 研究发现，生长素能够维持拟南芥bZIP59蛋白的稳定性，并增强其与LBD形成复合物的能力，bZIP59－LBD复合体直接靶向FAD－BD基因，并促进其转录，这有助于愈伤组织的形成。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 生长素通过调控植物细胞的基因表达而影响植物细胞全能性的表达
B. 植物自养型生物，培养基中不需要添加有机碳源
C. 培养基中添加激素的种类和含量会影响植物细胞发育的方向
D. 脱分化期间一般不需要光照，再分化时需要适当光照诱导叶绿素产生
6. 三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A. ①过程可利用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成
B. ②过程通常在低渗溶液中采用PEG融合法诱导原生质体融合
C. 杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，但结构不变
D. 图中所示的生产流程体现了细胞膜的流动性，但未体现植物细胞的全能性
7. 草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列说法正确的是（ ）
A. 需要用体积分数70%的酒精和质量分数5%次氯酸钠溶液对甲进行灭菌
B. 需要用不同的方法对两种选育方式的效果进行鉴定
C. 植物组织培养过程中，更容易受到培养条件和诱变因素的影响而产生定向突变
D. 方法一中选择甲作为组织培养材料的原因是该部位细胞的分生能力强
8. 科学家将C-Myc（原癌基因）、KI4（抑癌基因）、Sx2和Oct4等四种关键基因利用病毒转入高度分化的小鼠成纤维细胞内，获得iPS细胞，iPS细胞在适当的诱导条件下，可以定向分化成各种细胞。下列说法错误的是（ ）
A. 转入c-MyC、KIf4、Sx2和Oct4等的作用是诱导已分化细胞转变为未分化细胞
B. iPS细胞的分化程度与胚胎干细胞最接近
C. 在培养过程中，iPS细胞分裂生长到细胞表面相互接触时需要进行传代培养
D. 由题干可知所运用的病毒需要进行灭活处理
9. 尼帕病毒是一种新型人兽共患病毒（RNA病毒），能引起广泛的血管炎，感染者有发热、严重头痛、脑膜炎等症状，给人及动物带来严重危害。科研人员以猕猴为实验材料来生产抗尼帕病毒的单克隆抗体，实验流程如图所示，已知B淋巴细胞的基因型为AA、骨髓瘤细胞的基因型为BB，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 可用聚乙二醇或灭活的病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合
B. 两两融合后的融合细胞可能存在的基因型是AABB、AA、BB
C. 筛选1过程中未融合的细胞和同种细胞核融合的细胞会死亡
D. 筛选2为对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测
10. 研究发现；细胞膜上的转铁蛋白受体（TfR）与转铁蛋白（Tf）结合，可将铁元素运输至胞内。肿瘤细胞内铁元素浓度远高于正常细胞。科学家利用单克隆抗体技术，研制出鼠源性抗TfR抗体，可用于治疗小鼠肿瘤。下列说法错误的是（ ）
A. 肿瘤细胞表面TfR的表达量多于正常细胞
B. 抗TfR抗体通过阻止Tf与TfR的结合来抑制铁元素的摄取，抑制肿瘤细胞增长
C. 制备单克隆抗体时需给小鼠接种TfR，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞
D. 经特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞可直接注射到小鼠腹腔内增殖
11. 一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗 p72 的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（ ）
A. 注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大
B. 单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合
C. 利用该小鼠只能制备出一种抗 p72 的单抗
D. p72 部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
12. 科学家将大熊猫的体细胞和兔子的去核卵母细胞构建成重组细胞，使重组细胞成功发育为囊胚，标志着异种核质相容问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”。下列说法错误的是（ ）
A. 获取卵母细胞前，用含促性腺激素的饲料饲喂兔子可使其超数排卵
B. 可通过梯度离心法去除兔子卵母细胞中的细胞核
C. 可将大熊猫的体细胞直接注入兔子的去核卵母细胞
D. 选用的去核卵母细胞中的细胞质已成熟，可支持重组细胞发育成胚胎
13. “DNA粗提取与鉴定”的实验步骤是：研磨→去杂质→析出→鉴定：某研究小组欲探究不同的去杂质方法对实验结果的影响，实验结果如下表所示。下列说法错误的是（ ）
（注：OD260与OD280的比值可检查DNA纯度。纯DNA的OD260/OD280为1.8，当存在蛋白质污染时，这一比值会明显降低）
A. 猪肝和菜花均可作为提取DNA的材料
B. 对研磨液进行离心是为了加速DNA的沉淀
C. 离心法可以获得更高纯度的DNA
D. 析出时的离心转速明显高于去杂质时
14. 斑点印迹杂交是一种简单的DNA分子杂交技术，其技术流程如图。据此分析，下列说法正确的是（ ）
A. 放射性自显影技术可显示原培养皿中含目的基因的菌落位置
B. p和q片段能够杂交的主要原因是两单链的碱基排列顺序相同
C. p和q片段的杂交双链区域形成过程中有氢键和磷酸二酯键生成
D. 斑点印迹杂交技术可用于检测目的基因是否在受体细胞中成功表达
15. 目的基因和载体如果用同一种限制酶处理，连接时会出现正反接的情况，为鉴定筛选出的表达载体中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR后，结合电泳技术鉴定，图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因为长度300bp的片断。下列有关说法不正确的是（ ）
A. PCR退火温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链
B. 电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关
C. 选取引物甲丙，扩增出450bp长度片断时，可以说明目的基因正接
D. 选取引物甲乙，扩增出400bp长度片断时，可以说明目的基因反接
二、不定项项选择题（共5小题，每题3分）
16. 厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质，易腐烂变质，滋生病原微生物等。若处理不当，可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比的探究实验，并得出下图的实验结果。下面叙述错误的是（ ）
A. 巨大芽孢杆菌生长过程中需要氮源，圆褐固氮菌生长过程中不需要氮源
B. 要统计活菌数量可采用平板划线法和稀释涂布平板法
C. 将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36.据此可得出每升菌液中的活菌数为3.9×107
D. 处理该类厨余垃圾废液，两菌种的最佳接种量比为1：1
17. 某科研小组以感染菊花矮化类病毒（CSVd）的菊花品种“寒小白”为实验材料，研究不同培养方式对茎尖诱导分化成活率和脱毒效果的影响，结果如下表，下图是对不同试管苗进行RT-PCR（逆转录PCR）后的电泳示意图（引物根据CSVd的基因序列设计），下列说法错误的是（ ）
A. 实验中所用茎尖大小与茎尖诱导成活率正相关，与脱毒效果反相关
B. 试管苗2、5尚未脱毒成功，3、4已成功脱去CSVd病毒
C. RT-PCR技术中用到的酶有逆转录酶、DNA连接酶、热稳定DNA聚合酶
D. 热处理结合茎尖培养和病毒唑结合茎尖培养的脱毒率均优于单独的茎尖分生组织培养
18. 抗生素I-IV均可治疗黄色葡萄球菌（Sau）引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 配制培养基时应将培养基的pH调至微酸性
B. 测量菌落和抑菌圈直径时应直接在皿盖上测量
C. 抗生素IV治疗Sau感染引起的肺炎效果最好
D. 抑菌圈中出现的菌落可能是Sau发生了基因突变
19. 从中国仓鼠卵巢组织分离、培养的CHO细胞是生物制品领域最主要的生产细胞，广泛应用于各种药物蛋白的生产和基因工程。CHO细胞可以在培养基中高密度生长，能够分泌胞外蛋白且自身的分泌蛋白比较少。重组新冠病毒疫苗是将新冠病毒S蛋白受体结合区（RBD）基因通过基因工程技术，重组到中国仓鼠卵巢（CHO）细胞内，在体外培养并大量表达出RBD二聚体的方法。下列说法正确的是（ ）
A. CHO细胞作为新冠病毒的宿主细胞，提供病毒所需的营养物质
B. 与培养普通动物细胞相比，CHO细胞两次分瓶之间的间隔时间较短
C. 与大肠杆菌相比，CHO细胞表达的外源蛋白与天然蛋白更加相似，后期蛋白质的纯化更容易
D. CHO细胞能够表达出RBD二聚体，说明新冠病毒与仓鼠的遗传物质相同
20. OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法转化棉花，在棉花叶绿体内构建了一条新的代谢途径，提高了棉花的产量。下列叙述错误的是（ ）
A. 四个基因都在棉花叶绿体内进行转录、翻译
B. OsGLO1、EcCAT基因转录时以DNA的不同单链为模板
C. 应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的棉花细胞
D. 若转基因棉花的产量提高则可确定四个基因在棉花中成功表达
三、非选择题（共5题）
21. 某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了随机取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下：
请分析并回答下列问题：
（1）该实验中含有琼脂的培养基从物理性质来说，属于_______培养基，从功能上来说，属于____培养基，琼脂在培养基中的作用是_______。
（2）该培养基中只选择了_______作为唯一氮源。氮源在菌体内可以参与合成_______（答出2种即可）等生物大分子。
（3）琼脂培养基灭菌后，倒入培养皿中，冷凝后倒置，从而获得平板培养基，倒置的原因是_______。
（4）分解尿素的细菌能产生________酶，将尿素分解为_______。
（5）在稀释涂布平板法可对微生物进行计数的原理是________。
（6）实验结果：6号试管涂布的三个平板的菌落数为550、501、688，7号试管涂布的三个平板的菌落数为58、73、97，8号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28.该10g土壤样品中含有分解尿素的细菌的估算数目是_______个。该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目________。
22. 花椰菜（2n=18）易受黑腐病菌的危害，叶片表面出现黄色病斑，背部出现灰白色轮廓不分明的病斑，密生灰白色霉层，严重影响生长，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。科研人员用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株，流程如下图。据图回答下列问题：
（1）过程①所用的酶是_________。
（2）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的______，从而维持原生质体的形态和活性。细胞融合完成的标志是________的再生。
（3）经过②操作后，需筛选出融合的杂种细胞，显微镜下观察融合的活细胞中有黑芥叶肉细胞的_________（填写细胞器名称）存在，可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（4）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1~4中一定是杂种植株的有_______。
（5）进一步检测获得的杂种植株的染色体条数，结果如表，除了紫外线处理使黑芥原生质体染色体片段化导致染色体条数改变以外，杂种植株染色体条数在24-34范围内不等的原因可能是_________。
杂种植株染色体数目
（6）最后需通过实验验证杂交植株是否培育成功，依据危害特点简要写出思路_____。
23. 我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请据图分析回答：
（1）获得食蟹猴体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是_____。
（2）进行过程①时，细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_____，且在进行细胞原代培养时会出现_____现象。
（3）研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如下图所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是_____。
（4）科研人员发现对于灵长类动物的体细胞来说，单靠核移植本身并不足以使重构胚顺利发育成存活个体，还需要对供体细胞核进行表观遗传修饰才能开启细胞核的全能性。研究表明染色体组蛋白动态可逆地被修饰酶所改变，控制着基因的表达（如图所示）。
①据图分析，（ ）组蛋白乙酰化水平和（ ）组蛋白去甲基化水平有利于相关基因恢复表达，开启细胞核全能性，从而显著提高重构胚的发育率。括号内应填入的选项是_____。
A．提高；提高 B．降低；降低 C．提高；降低 D．降低；提高
②科研人员通过设计实验验证以上观点。供选择试剂为：组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、生理盐水。
实验思路：将重构胚均分为甲、乙、丙、丁四组，分别注入等量的组蛋白去乙酰化酶抑制剂、_____、_____、等量生理盐水。一段时间后分别检测各组的胚胎发育率。
实验结果：各组的胚胎发育率丙组>甲组=乙组>丁组。
24. 牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原菌，它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白，在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体，并进行相关研究。
（1）将等量的纯化VspX蛋白作为_________分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗VspX抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。
（2）在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是_________。然后取小鼠的脾脏细胞用_________试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到_________。该细胞具有_________的特点。
（3）一段时间后，将（2）所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如下图。
①在检测时需要将VspX蛋白固定于固相载体表面制成固相抗原，并加入多孔板培养槽中_________（细胞、上清液），即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将________洗去。
③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表_______。
（4）将上述细胞经胰蛋白酶处理，制成细胞悬液，置于二氧化碳培养箱中进行扩大培养，提取抗VspX单克隆抗体与不同抗原进行杂交检测，结果如下图
依据图的实验结果表明抗VspX单克隆抗体不能与________结合（图中数字），具有很强的特异性，可用于后续关于牛支原体所引发相关疾病的________等方面的研究。
25. 无核葡萄品质优良，但抗寒性差。我国科学家以中国野生葡萄资源中抗寒性最强的山葡萄为材料，对抗寒相关Va基因的功能展开相关研究。
（1）通过前期研究结果，科研人员推测Va基因可能为转录因子。转录因子是一类特定的蛋白，可以调控______与启动子的结合。
（2）为进一步验证Va基因转录激活功能，科研人员利用pG载体首先构建了重组质粒，导入到敲除GAL4基因的酵母AH109菌株中，如下图所示。GAL4基因可编码酵母中具有转录激活功能的蛋白，AH109菌株为色氨酸、组氨酸缺陷型菌株，只有在添加相应氨基酸的培养基中才能生长。
①为了能够筛选得到重组酵母，培养基的配方为下列选项中的_____组，此外还需额外添加______，通过显色反应做进一步验证。
②完善实验过程及对应结果______
（3）利用本地不抗寒葡萄品种“红地球”进一步探究Va基因的功能，科研人员构建了含Va基因和抗除草剂基因的稳定表达载体，用________法进行转染。请选择正确的后续实验操作并进行排序____。
A．72小时室温培养
B．72小时低温诱导培养
C．用PCR方法筛选出Va基因阳性植株
D．检测植株中Va蛋白的含量
E．用不含组氨酸的培养基筛选愈伤组织
F．用含除草剂的培养基筛选愈伤组织去杂质方式
沉淀质量（g）
DNA浓度（ng/μL）
OD260/OD280
二苯胺鉴定
离心
0.068
81.5
1.53
蓝色
4℃冰箱静置
0.1028
3364
1.41
处理方法
样本存活数
CSVd脱毒率
长度<0.3mm的茎尖分生组织培养
6
59.78
长度0.3-0.7mm的茎尖分生组织培养
75
22.6
长度0.7-1.0mm的茎尖分生组织培养
90
6
热处理结合茎尖培养
71
36.62
病毒唑结合茎尖培养
71
46.48
材料
染色体数
花椰菜
18
黑芥
16
杂种植株
28
杂种植株
26
杂种植株
30
杂种植株
24
杂种植株
34
A组：加色氨酸和组氨酸 B组：不加色氨酸和组氨酸
C组：加组氨酸，不加色氨酸 D组：加色氨酸，不加组氨酸
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