运城市康杰中学2022-2023学年高二下学期第二次月考生物试卷（含答案）

运城市康杰中学2022-2023学年高二下学期第二次月考生物试卷

学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、单选题

1、微生物需要从外界吸收营养物质来维持正常的生长和繁殖。下列关于微生物营养的叙述，错误的是(   )

A.尿素分解菌和纤维素分解菌的培养基中可能含有相同的无机盐

B.乳酸菌需要的特殊营养物质是指其自身不能合成的某些无机物

C.只含有水和无机盐两类成分的培养基中有可能形成生物群落

D.筛选硝化细菌的培养基中不需加入适宜浓度的有机碳源

2、无菌技术在生产、生活和科研实践中有着广泛的应用。下列相关叙述正确的是(   )

A.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染

B.在100℃条件下煮沸5~6分钟属于灭菌方法，可杀死微生物的营养细胞和部分芽孢

C.用于植物组织培养的外植体要进行灭菌处理

D.动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行

3、下图为实验室中酵母菌纯培养过程的部分操作步骤，下列说法正确的是(   )

A.微生物的纯培养物就是指不含代谢废物的微生物培养物

B.步骤①中，用手触摸估计培养基冷却至室温后开始倒平板

C.①步骤使用的培养基制备过程是先调pH再灭菌

D.③到④过程中，每次划线后都需要灼烧接种环并蘸取菌液

4、丙草胺（C15H22CNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如下图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是(   )

A.提供适宜的温度，将培养基的pH调至中性或弱碱性，有利于降解菌的生长繁殖

B.用平板划线法和稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果往往比实际少

C.配制以丙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可以提高降解菌的浓度

D.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个

5、下列关于微生物发酵过程的说法，正确的是(   )

A.分离、提纯产物是发酵工程的中心环节

B.只要不断地向发酵罐中通入液体培养基，就能保证发酵的正常进行

C.在发酵工程的发酵环节中，发酵条件会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径

D.在发酵过程中，要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件，不需添加营养组分

6、发酵工程在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列叙述错误的是(   )

A.啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成，大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段完成

B.利用苏云金杆菌能产生伴孢晶体，可以用来做微生物农药

C.利用发酵工程可以产生微生物肥料来增加土壤肥力、改善土壤结构、促进植株生长，如根瘤菌肥、固氮菌肥等

D.在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力

7、愈伤组织是一种高度液泡化的无定形的薄壁组织块，在植物细胞工程中有着多种应用，如下图所示。下列说法正确的是(   )

A.②④⑤⑦过程均经历了再分化

B.图中④和⑧过程的培养基中都有琼脂

C.植物的微型繁殖和脱毒苗的获得均需通过①④过程

D.①④和①⑧两种途径的原理均是植物细胞的全能性

8、如图为某同学构建的细胞工程知识框架。以下相关说法正确的是(   )

A.图中①指植物体细胞杂交，该过程常用灭活的病毒处理两种植物细胞

B.图中②属于分子水平上的生物工程技术

C.动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，依据的原理相同，都能形成杂种细胞和杂种个体

D.用聚乙二醇处理大量混合在一起的两种植物细胞的原生质体，所获得的融合细胞不都具备双亲的遗传特性

9、科研人员研究了某植物茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如图。研究发现，对茎尖用52°C热水处理30min再用38°C热水处理一段时间，脱毒效果更好。下列有关说法错误的是(   )

A.培育脱毒苗依据的原理是茎尖病毒极少以及细胞的全能性

B.实验结果表明茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低

C.热处理可能使组织中病毒减少或减弱其侵染增殖能力

D.根据本实验，培养脱毒苗时茎尖的适宜大小为0.12mm

10、灭活疫苗是将培养扩增的活病毒通过物理或化学手段灭活后，经过系列纯化制备的生物制剂。国产新冠灭活疫苗的大致生产流程如下，将抗原性强的病毒接种到Vero细胞中培养，再使病毒经过β-丙内酯灭活等过程制备成疫苗。下列相关说法错误的是(   )

A.Vero细胞的细胞膜上存在新冠病毒能够特异性识别的受体

B.培养Vero细胞时，需要对培养液和所有培养用具进行灭菌，以保证无毒的环境

C.培养时，需将Vero细胞置于含95%空气和5%CO2的气体环境中

D.β-丙内酯灭活会使新冠病毒失去感染能力但不会破坏其抗原结构

11、非洲猪瘟病毒（ASFV）是一种具有包膜的双链DNA病毒，病毒蛋白p30位于病毒的包膜上，在病毒进入宿主细胞时期具有重要作用。我国利用已免疫的小鼠细胞和骨髓瘤细胞杂交，成功研制出针对p30的单克隆抗体。下列叙述正确的是(   )

A.单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选择透过性

B.针对p30的单克隆抗体可用于ASFV早期诊断试剂盒的研发

C.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合

D.制备过程中可将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，从血浆提取单克隆抗体

12、世界首例猪肾移植人体手术成功，3天均未发生排异现象。这颗肾脏来自一头实施过基因编辑的猪。下图为基因编辑猪的培育流程，有关说法错误的是(   )

A.对1号猪进行基因编辑时，应在其基因组中导入某种调节因子以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因

B.对2号猪使用促性腺激素使其超数排卵后，收集培养至MⅡ期的卵母细胞通过显微操作吸出纺锤体一染色体复合物

C.对1号猪和2号猪应进行同期发情处理，使二者处于相同的生理状态

D.重组细胞还需用电刺激、Ca2+载体、乙醇等方法激活，使其完成细胞分裂和发育进程

13、据报道，世界上仅剩下两头雌性北方白犀牛，实验室只留有冷冻的北方白犀牛的精子。若通过胚胎工程技术尝试拯救该物种，下列叙述正确的是(   )

A.体外受精时若观察到雌雄原核核膜融合成一个细胞核，可作为受精标志

B.这样人工繁育的种群与野生种群相比，遗传多样性降低，野外生存能力下降

C.可通过胚胎分割技术增加其数量，注意将桑葚胚阶段的内细胞团均等分割

D.可用雌性北方白犀牛体细胞核移植技术进行克隆，得到多头子代后，让其自行繁衍

14、单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了下图所示研究。请据图分析，下列说法正确的是(   )

A.为使A野化单峰骆驼超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素

B.胚胎移植到C体内前收集胚胎并检查，是为了避免受体母牛对外来胚胎产生免疫排斥

C.卵裂期，胚胎的总体积不增加，但有机物总量增加

D.可采用胚胎分割技术提高胚胎利用率，胚胎分割移植后获得的动物个体之间性状不完全相同

15、如下图为诱导多能干细胞（iPS细胞）用于治疗糖尿病的示意图，下列相关叙述错误的是(   )

A.与高度分化的细胞相比，iPS细胞的分化潜能较弱

B.干细胞存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等

C.除图中的成纤维细胞，已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞

D.将分化得到的胰岛细胞移植回病人体内治疗，理论上可避免免疫排斥反应

16、基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的，正是这些学科的理论基础和相关技术的发展催生了基因工程。下列有关基因工程发展史的说法正确的是(   )

A.肺炎链球菌的转化实验证明了DNA是主要的遗传物质，且DNA可在同种生物不同个体间转移

B.华人科学家张峰及其团队利用CRISPR技术编辑了哺乳动物基因组，该技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换

C.基因工程诞生的理论基础包括DNA双螺旋结构的确立、遗传密码的破译、工具酶的发现等

D.尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的密码子为基因复制提供了理论依据

17、下列关于基因工程技术中涉及的酶的说法，正确的是(   )

A.E·coliDNA连接酶能催化平末端和黏性末端的连接

B.切割质粒的限制酶均特异性地识别6个核苷酸序列

C.用限制酶处理目的基因和Ti质粒，涉及氢键和磷酸二酯键的断裂

D.质粒被限制酶切割一次后，会产生4个游离的磷酸基团

18、质粒是基因工程中的“分子运输车”，其结构与功能相适应，下列说法错误的是(   )

A.质粒可以携带外源DNA片段进入受体细胞并进行自我复制

B.质粒上含有一个或多个限制酶切割位点，便于外源DNA插入

C.质粒上常具有某些特殊的标记基因

D.目前常用的质粒主要来自于噬菌体或动植物病毒

19、人凝血酶Ⅲ是一种分泌蛋白，可预防和治疗急慢性血栓。重组人凝血酶Ⅲ是世界上首个上市的动物乳腺生物反应器生产的重组蛋白药物，下列说法错误的是(   )

A.可从人细胞中提取RNA后利用逆转录方法获取目的基因

B.利用乳腺生物反应器生产人凝血酶Ⅲ属于基因工程的应用

C.用显微注射技术将表达载体导入乳腺细胞来获得转基因动物

D.只在动物乳腺细胞中检测到人抗凝血酶Ⅲ基因，不能说明该技术已获得成功

20、下图表示PCR过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R表示方向。下列叙述正确的是(   )

A.PCR过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制

B.②链从L到R的方向为3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板

C.用PCR方法扩增目的基因时不需知道基因的全部序列

D.以1个DNA为模板经3次循环需消耗8个引物③

21、人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药，改造后的t-PA蛋白能显著降低出血副作用。下图表示构建含t-PA改良基因重组质粒的过程示意图。相关说法错误的是(   )

A.构建重组质粒时，选用的限制酶是XmaⅠ和NheⅠ

B.需要DNA连接酶将t-PA改良基因与质粒连接

C.新霉素抗性基因的作用是便于将导入质粒的大肠杆菌筛选出来

D.在加入新霉素的培养基中选择呈白色的菌落选育工程菌株

22、斑点印迹杂交是一种简单的DNA分子杂交技术，其技术流程如图。据此分析，下列说法正确的是(   )

A.斑点印迹杂交技术可用于检测目的基因是否在受体细胞中成功表达

B.p和q片段的杂交双链区域形成过程中有氢键和磷酸二酯键生成

C.p和q片段能够杂交的主要原因是两单链的碱基排列顺序相同

D.放射性自显影技术可显示原培养皿中含目的基因的菌落位置

23、大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述正确的是(   )

A.提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的DNA等物质溶解

B.将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂进行鉴定

C.电泳时，电泳缓冲液不能没过凝胶以免凝胶加样孔中的电泳样液流出

D.根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点

24、干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，某基因公司生产干扰素的过程如图所示。下列说法错误的是(   )

A.利用酵母菌作为工程菌生产干扰素原因之一是它出芽生殖方式繁殖的速度快

B.从人的淋巴细胞中提取的干扰素基因为目的基因，目的基因主要是编码蛋白质的基因

C.为了使带干扰素基因的质粒导入酵母菌，可以用Ca2+处理酵母菌

D.若选用大肠杆菌作为工程菌，也可以直接获得有生物活性的干扰素

25、乳酸菌无氧呼吸过程产生的丙酮酸会在LDH酶的催化下产生乳酸，如图所示。由于工业需求，需要利用苯丙酮酸生产①处基团体积更大的苯乳酸。因此科研人员拟改造原有的LDH，使其第52位的酪氨酸替换为亮氨酸。使其成为能生产苯乳酸的mLDH。下列说法正确的是(   )

A.获得mLDH的基本思路是：改造基因→表达→形成具有特定氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能

B.在分子水平上，可利用PCR等技术检测细胞内是否合成新的目的蛋白质

C.上述改造过程属于蛋白质工程技术，mLDH编码基因原本不存在于自然界中

D.蛋白质工程的操作是在蛋白质分子水平上进行氨基酸的增减、替换等

二、填空题

26、回答下列与发酵相关的问题：

(1)在葡萄酒的自然发酵过程中，葡萄汁装入发酵瓶要留1/3的空间，这种做法的目的是_____（答出两点即可），发酵时一般需要将温度控制在______。

(2)开瓶后的葡萄酒如果密封不严，会出现酸味，原因是______写出相应的化学反应方程式______。

(3)研究发现，经葡萄里面的糖分自然发酵而成的酒精，含量一般在10%~13%为最佳，发酵时的温度和时间会影响果酒发酵产生的酒精的含量。为了找到适合生产的最佳发酵温度和时间。请设计出探究的思路：______。

(4)制作传统泡菜的发酵原理是______（写出反应式），发酵过程中泡菜坛盖边沿的水槽中要注满水原因是_______。

三、探究题

27、新型冠状病毒抗原检测试剂盒是相对比较简便、快速的检测方法，抗原检测试剂盒的生产依赖于新型冠状病毒单克隆抗体的制备。制取新型冠状病毒S蛋白的单克隆抗体部分过程如下图所示，请回答下列问题：

（1）图中操作a是指对小鼠注射______，之后一般从该小鼠的______中提取淋巴细胞，并在体外让淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合的特有方法是____________。

（2）诱导融合后至少要经过两次筛选，图中的筛选1是指利用HAT选择培养基将具有__________特点的_________细胞筛选出来；筛选2需要将细胞接种到多孔培养板上，每个孔接种______个细胞，取上清液作为待测样本进行抗体阳性检测，检测原理如下图所示：

加入酶标抗体一段时间后，需要将未与_____________结合的酶标抗体洗脱。据图可知在抗体检测中，杂交瘤细胞呈阳性的判断依据为__________________________________。

（3）单克隆抗体的优点是______________________（答出两点）。利用筛选出的符合要求的细胞生产单克隆抗体，既可以将细胞注入小鼠腹腔内进行生产，也可以在体外生产，两种方式相比，后者的优点是______________________。

四、读图填空题

28、我国是世界上最大的马铃薯生产国，青枯病是马铃薯最常见的细菌性病害。科研人员利用易感青枯病马铃薯（2n=24）与抗青枯病茄子（2n=24）进行体细胞杂交，培育具有抗病性状的马铃薯新品种。

(1)马铃薯和茄子的体细胞需经_______________酶处理后获得原生质体。再经诱导获得融合细胞，融合细胞通过________________过程形成愈伤组织，最终获得再生植株。可以采用将再生植株的基因组与_______________的基因组比对的方法筛选出杂种植株。

(2)对筛选出的某杂种植株进行青枯菌菌株接种实验，研究其对不同毒力青枯菌菌株的抗性效果，部分实验处理及结果如下表。

表中应增加对_______________进行青枯菌接种的实验作为对照。结果显示，接种不同菌株的杂种植株的病情指数均低于对照组，且最初的发病时间_______________，说明此杂种植株具有抗青枯菌能力。由表还可知此杂种植株对_______________的抗性效果最好。

(3)为寻找与抗性有关的基因，研究人员比较抗病和感病体细胞杂种植株在接种青枯菌后的基因表达差异，并与茄子抗性基因所在位置比对，推测基因SmPGH1和smGSTZ5与青枯病抗性有关。为验证其关系，测定不同杂种植株接种青枯菌后SmPGH1和SmGSTZ5基因的相对表达量，结果如下图。

结果说明，SmPGH1可能是茄子青枯病抗性的一个关键基因，而SmGSTZ5基因不是，理由是_______________。

29、环状定点诱变技术通过设计特定引物进行PCR，来实现目标载体的单碱基突变，从而生产出满足需求的质粒载体。质粒pUC18中含有限制酶Eam1105Ⅰ（识别序列为5'-GACGGGAGTC—3'）和EcoRⅠ的识别序列。为使质粒pUC18不能被限制酶Eam1105Ⅰ识别，但依然具有氨苄青霉素抗性，现对质粒pUC18第1695个碱基（图方框中的碱基）进行诱变，设计了具有诱变位点的引物P1和不具有诱变位点的引物P2。具体操作流程如图所示。

（1）为使诱变后的质粒不能被限制酶Eaml105Ⅰ识别，但依然具有氨苄青霉素抗性，选择质粒突变位点时应注意_____。

（2）进行上述PCR反应，缓冲液中需提供pUC18质粒，P1、P2两种引物以及________，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。至少经过_____个循环，会出现双链均被诱变的线性质粒。扩增得到的线性质粒需在______酶的作用下才能连接成环状质粒。

（3）提取连接产物（环化后的质粒），经过EcoRⅠ、Eaml105Ⅰ双酶切，然后进行电泳，可根据结果判断质粒pUC18的第1695个碱基诱变是否成功，判断的理由是__________。

30、苯丙酮尿症是单基因遗传病，科学家将正常基因D导入该病患者的细胞，以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒，图乙为含有目的基因D的DNA片段，图丙为重组载体的示意图。Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使菌落呈蓝色、而非白色，EcoRⅠ（0.6Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。回答下列问题：

(1)基因工程操作的核心步骤是___________。图甲中三种质粒适宜作为运载体的是质粒_________，与另外两种质粒相比，其作为载体的优点是___________。

(2)获取目的基因D时应选择乙图中的___________对其所在的DNA进行切割。如果仅知道D基因首尾的部分核苷酸序列，根据D基因已知核苷酸序列合成___________，利用PCR扩增目的基因。

(3)将目的基因D和甲图中相应质粒连接后，得到图丙中三种方式。为选出正向连接的重组质粒，使用___________对质粒单酶切后，进行电泳分析。若是正向连接载体，电泳图谱中出现长度为_________Kb和___________Kb两条带。

(4)利用自身不含lacZ基因且对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，要在已转化的含重组质粒、已转化的含空质粒的受体细胞和未转化成功的细胞中筛选出已转化的含重组质粒的受体细胞的方法是：在含有__________________的培养基上培养，形成_______色菌落的为导入重组质粒的受体细胞。

参考答案

1、答案：B

2、答案：D

3、答案：C

4、答案：B

5、答案：C

解析：A、发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面，其中发酵过程是发酵的中心阶段，A错误； B、发酵过程中应随时检测培养液中的细菌数目、产物浓度等，同时应对发酵过程中的一些条件进行控制才能保证发酵的正常进行，B错误； C、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件，这是因为环境条件的变化，不仅会影响菌种的生长繁殖，而且会影响菌种代谢产物的形成。例如，在谷氨酸发酵过程中，当pH呈酸性时，谷氨酸棒状杆菌就会生成乙酰谷氨酰胺；当溶氧不足时，生成的代谢产物就会是乳酸或琥珀酸，C正确； D、发酵过程是发酵的中心阶段，要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件，还要及时添加必需的培养基组分，以满足菌种的营养需要，D错误。

故选：C。

6、答案：A

7、答案：C

8、答案：D

9、答案：D

解析：A、茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可利用茎尖进行组织培养形成脱毒苗，所依据的原理是细胞全能性，A正确； B、实验结果表明茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低，B正确； C、对茎尖用52℃热水处理30min再用38℃热水处理一段时间，脱毒效果更好，说明适当高温处理可能会使病毒蛋白质变性，因此热处理可能使组织中病毒减少或减弱其侵染增殖能力，C正确； D、在茎尖外植体大小为0.27mm时，脱毒率和成苗率均较高，因此脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm,D错误。

故选：D。

10、答案：B

解析：A、题干中用Vero细胞培养新冠病毒，因此Vero细胞的细胞膜上需存在新冠病毒能够特异性识别的受体，便于病毒识别，A正确； B、培养Vero细胞时，需要对培养液和所有培养用具进行灭菌，以保证无菌的环境；培养液需要定期更换，及时清除代谢产物，以保证细胞培养的无毒的环境，B错误； C、需将Vero细胞置于含95%空气和5%CO2混合气体的培养箱中进行培养，O2是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH,C正确； D、β-丙内酷灭活会使新冠病毒失去感染能力，但不会破坏其表面的蛋白结构，保留其抗原性，D正确。

故选：B。

11、答案：B

12、答案：C

13、答案：B

解析：A、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子。所以判断卵细胞是否受精的重要标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，卵细胞受精完成的标志是雌、雄原核融合；另外，也不会出现题干描述的“核膜融合”的情况，A错误； B、利用胚胎工程人工繁育的种群，由于亲本数量少，得到的后代遗传相似度较高，遗传多样性降低；野生种群亲本数量较多，后代遗传多样性较高，即存在多种可遗传变异可供自然选择，其适应复杂环境的能力较强，所以利用胚胎工程人工繁育的种群不如野生种群野外生存能力强，B正确； C、内细胞团是囊胚阶段出现，即通过胚胎分割技术增加其数量，注意将囊胚阶段的内细胞团均等分割，C错误；D、用雌性北方白犀牛体细胞克隆出多头子代后，由于后代均为雌性，因此不能自行繁衍， D错误。故选：B。

14、答案：D

15、答案：A

16、答案：B

17、答案：C

18、答案：D

19、答案：C

解析：A、可从人细胞中提取RNA后利用逆转录PCR技术获取目的基因，此时获得的目的基因没有启动子、终止子等，A正确； B、利用乳腺生物反应器生产药物，这属于动物基因工程的应用，B正确； C、动物受精卵全能性最高，应用显微注射技术将表达载体导入受精卵来获得转基因动物， C错误； D、只在动物乳腺细胞中检测到人抗凝血酶Ⅲ基因，不能说明该技术已获得成功，还需要检测分泌的乳汁中是否含有人凝血酶Ⅲ，D正确。

故选：C。

20、答案：C

21、答案：A

22、答案：D

23、答案：B

24、答案：D

解析：A、利用酵母菌作为工程菌生产干扰素原因之一是酵母菌为真核生物，细胞中具备蛋白质加工的结构，且可利用出芽生殖快速繁殖，A正确； B、图中目的基因的获取方法是从人的淋巴细胞中提取的，该目的基因能编码干扰素， B正确； C、为了使带干扰素基因的质粒导入酵母菌，可以用Ca2+处理酵母菌，进而提高转化效率，C正确； D、若选用大肠杆菌作为工程菌，由于大肠杆菌为原核生物，细胞中不具有加工蛋白质所需要的内质网和高尔基体结构，因而不能直接获得有生物活性的干扰素，D错误。

故选D。

25、答案：C

26、答案：(1)为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气；防止发酵旺盛时发酵液溢出；18-30℃

(2)空气中的醋酸菌进入发酵瓶中，会将葡萄酒中的乙醇变为醋酸；C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O+能量

(3)设置不同的温度，分别在不同的发酵时间测定发酵液中酒精的含量，酒精含量最快达到10%~13%的温度和相应时间为最佳

(4) C6H12O6C3H6O3+能量；为发酵提供无氧环境

27、答案：（1）新冠病毒的S蛋白/抗原蛋白；脾脏；灭活的病毒

（2）既能产生抗体又能无限增值；杂交瘤；1；抗S蛋白抗体；酶促反应底物由无色变为蓝色

（3）纯度高、灵敏度高、特异性强、可大量制备等（答出两点即可）；可大量生产单克隆抗体，且纯度高，容易提取

解析：

28、答案：(1)纤维素酶和果胶；脱分化；抗青枯病茄子和易感青枯病马铃薯

(2)易感病马铃薯植株；晚于对照组；菌株A

(3)接种青枯菌后SmPGH1在抗病体细胞杂种植株中表达量显著增加，在感病体细胞杂种植株中没有明显变化；而SmGSTZ5基因在抗病和感病体细胞杂种植株中的表达没有规律

29、答案：（1）诱变的位点位于限制酶Eam1105Ⅰ识别序列中，诱变后编码的氨基酸不变或不影响氨苄青霉素基因的正常表达

（2）耐高温DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸；2；T4DNA连接

（3）诱变后质粒的电泳图谱中只有1条条带，未诱变质粒会出现2条条带

30、答案：(1)基因表达载体的构；B；有标记基因，复制原点不会被限制酶切割

(2)PvuⅠ；引物

(3)EcoRⅠ；1.2；5.5

(4)氨苄青霉素和X-gal；白

解析：（1）本题结合图文考查基因工程的基本操作程序。基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤,其中基因工程的核心是基因表达载体的构建。图中质粒A缺少标记基因;质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制。因此,不能作为目的基因运载体。质粒B中含有Ap基因和lacZ基因,用和目的基因相同的限制酶切割时,lacZ基因遭到破坏,但保留了Ap基因,复制原点也不受影响,故选质粒B。
（2）分析乙图,目的基因D上有两个PvuⅠ酶切位点和一个EcoRⅠ酶切位点,而EcoRⅠ酶切会破坏目的基因D的结构,因此应选用PvuⅠ酶对其所在的DNA进行切割。利用PCR扩增技术可以获得大量的目的基因,用PCR扩增基因之前,需要先根据该基因已知核苷酸序列合成相应的引物。
（3）在目的基因D上存在EcoRⅠ酶的切割位点,因此在基因工程的操作过程中,需要选出正向连接的重组质粒,应使用该酶切重组质粒。依题意和图甲、乙可知,由于目的基因D的长度为4.0Kb,因此用质粒B构建的重组质粒的长度为4.0Kb+2.7Kb=6.7Kb,重组质粒被EcoRⅠ酶完全切割后,出现两个不同长度片段,若是正向连接(目的基因D上的EcoRⅠ酶切位点与质粒B上的EcoRⅠ酶切位点的距离最近),会得到0.2Kb+1.0Kb=1.2Kb和(2.7Kb+4.0Kb)-1.2Kb=5.5Kb的两个片段。
（4）在含有氨苄青霉素的培养基上加入X-gal培养经转化后的细胞,导入重组质粒的受体细胞,质粒上lacZ基因被破环,不能将无色化合物X-gal转化成蓝色物质,且质粒中含有Ap基因,故受体菌能在培养基上正常生长,形成白色菌落;导入空质粒的受体细胞,具有Ap基因和lacZ基因,故能在培养基上生长,且能将无色化合物X-gal转化成蓝色物质,菌落呈蓝色;未转化成功的细胞中不含Ap基因,故不能在含有氨苄青霉素的培养基上生长。