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高中生物北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第五节 发酵工程的应用课堂检测
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这是一份高中生物北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第五节 发酵工程的应用课堂检测，共15页。试卷主要包含了下列有关无菌技术的叙述错误的是，下列叙述正确的是，培养禽流感病毒时，应该选用等内容，欢迎下载使用。
1．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述正确的是（ ）
A．操作顺序为计算．称量．溶化．倒平板．灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C．待培养基冷却至44℃以下时进行倒平板
D．待平板冷却凝固约5～10s后将平板倒过来放置
2．下列关于配制培养基的叙述中正确的是（ ）
A．制作固体培养基一定要加入琼脂
B．加入青霉素的培养基可培养放线菌
C．培养自生固氮菌的培养基中不需添加氮源
D．发酵工程一般用固体培养基
3．下列有关无菌技术的叙述错误的是（ ）
A．对实验操作空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒
B．用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基要进行灭菌
C．高压蒸汽灭菌锅需将冷空气彻底排除后才能将锅密闭
D．使用后的液体培养基在丢弃前要用煮沸消毒法进行处理
4．下列叙述正确的是（ ）
A．培养细菌时需将培养基的温度调至15~18℃
B．在进行稀释涂布平板法操作时，需要连续画线，且起点和终点不相连
C．倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置
D．大肠杆菌纯化培养只可以用平板划线法
5．微生物的实验室培养中，有关叙述不正确的是（ ）
A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性
C．不同种类的微生物的碳源可能不同
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-4℃保藏的方法
6．培养禽流感病毒时，应该选用（ ）
A．固体培养基B．液体培养基
C．牛肉汤D．活鸡胚
7．为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组的培养基分别是（ ）
A．未接种的选择培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
B．未接种的培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
C．接种了的选择培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D．接种了的培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
8．下列有关大肠杆菌纯化培养和计数的叙述，错误的是（ ）
A．培养基的pH应是中性或微碱性
B．测定其数目可采用滤膜法
C．培养过程包括培养基的配制和纯化
D．接种只能采用平板划线法
9．甲．乙．丙是三种微生物，下表Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲．乙．丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲．丙都不能。下列说法正确的是（ ）
注：“+”表示培养基中加入了这种物质，“-”表示培养基中没有加入这种物质。
A．甲．乙．丙都是异养型微生物
B．甲．乙都是自养型微生物，丙是异养型微生物
C．甲是自养微生物．乙是异养微生物．丙是固氮微生物
D．甲是固氮微生物．乙是自养微生物．丙是异养微生物
10．关于微生物培养中的无菌技术，叙述错误的是（ ）
A．实验前需用 75%的酒精棉球擦拭双手
B．配制好的培养基可通过高压蒸汽进行灭菌
C．接种环可以通过酒精灯火焰灼烧进行灭菌
D．使用后的培养基不需要灭菌可直接丢弃
粉状硫
10g
K2HPO4
4g
FeSO4
0．5g
蔗糖
10g
（NH4）2SO4
0．4g
H2O
100ml
MgSO4
9．25g
CaCl2
0．5g
Ⅰ
+
+
+
+
-
+
+
+
Ⅱ
+
+
+
-
+
+
+
+
Ⅲ
+
+
+
+
+
+
+
+
11．在三个培养皿中分别加入 10mL 不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养后，计算菌落数，结果如下表。下列选项正确的是（ ）
A．该实验采用的是液体培养基
B．该实验中应该选取培养 12 小时时的记录作为实验结果
C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要特殊营养物质
D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要糖类
12．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是（ ）
①牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源．氮源．磷酸盐．维生素
②等培养基冷却至室温时进行倒平板
③待平板冷却凝固5？10分钟后将平板倒过来放置
④操作顺序为计算．称量．溶化．倒平板．灭菌
⑤将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解
A．①④⑤B．②③⑤C．①②④D．②④⑤
13．下列有关微生物培养基种类及配制原则的表述，正确的是（ ）
A．培养霉菌时需将培养基的 pH 调节到中性或微碱性
B．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产
C．任何培养基都必须含有碳源．氮源．水．无机盐及生长因子
D．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到 pH．O2．渗透压等的影响
14．通常用来作为菌种鉴定的重要依据是
A．菌落B．细菌形态C．细菌体积D．细菌结构
15．关于干热灭菌与高压蒸汽灭菌的操作方法，下列叙述正确的是（ ）
①操作时，均不能将物品摆放太挤
②操作过程中，灭菌物品均不能与筒壁接触
③干热灭菌时，等温度下降到70℃以下后，才能打开箱门
④高压蒸汽灭菌时，打开排气阀使压力表降到零后，才能打开盖
A．①②④B．②③④C．①②③D．①③④
16．科研小组欲检测学校直饮水中大肠杆菌是否超标，下列实验操作中不合理的是（ ）
A．应设置未接种的培养基作为对照
B．待检测水样需要经过灭菌操作后再检测
C．用稀释涂布平板法接种并计数大肠杆菌
D．接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养
17．许多生物学实验十分重视无菌操作，防止杂菌污染。下列操作正确的是（ ）
A．煮沸可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢
B．家庭制作葡萄酒时，要将容器和葡萄进行灭菌
C．加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
D．用自然生长的离体植物组织进行组织培养时，不需要进行消毒
18．若在固体培养基上用稀释涂布法培养细菌，看到的结果不可能是
A．B．
C．D．
参考答案与试题解析
1．【答案】B
【解析】
试题分析：
培养基的配制流程：计算．称量．溶化．灭菌（高压蒸汽灭菌）．倒平板（无菌操作）。
解答：
A．操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，A错误；
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，因为牛肉膏会黏在称量纸上，B正确；
C．待培养基冷却至50℃以下时进行倒平板，C错误；
D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置，D错误。
故选B。
2．【答案】C
【解析】
试题分析：
3．【答案】D
【解析】
试题分析：
微生物分离的基本步骤为配制培养基．接种．培养筛选等。无菌培养，是指在灭菌条件下进行的培养试验。首先要对培养材料灭菌，其次对所使用的容器．介质．营养液等都要高压灭菌，在试验全过程中严格检测无菌条件。
解答：
A．为避免杂菌污染，对实验操作空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒，A正确；
B．用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基要进行灭菌，一般是进行高压蒸汽灭菌，B正确；
C．高压蒸汽灭菌锅需将冷空气彻底排除后才能将锅密闭，否则冷空气的存在会影响灭菌效果，C正确；
D．使用后的液体培养基在丢弃前要用高压蒸汽灭菌法进行处理，D错误。
故选D。
4．【答案】C
【解析】
试题分析：
本题主要考查微生物的分裂和培养的相关知识，要求考生识记平板划线法和稀释涂布平板法的操作步骤，属于考纲识记和理解层次的考查。
解答：
A．不同细菌适宜生存的温度不同，因此需要根据不同的细菌调节不同的温度，A错误；
B．在进行平板划线法操作时，需要连续画线，且起点和终点不相连，B错误；
C．倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置，防止冷凝水污染培养基，C正确；
D．大肠杆菌纯化培养可以采用平板划线法或稀释涂布平板法，D错误。
故选C。
5．【答案】D
【解析】
试题分析：
菌种临时保藏为4℃斜面培养基保存，长期保存可-20℃甘油管藏。
解答：
A．对于频繁使用的菌种，长期保存不适合取用，故用临时保藏的方法，A正确；
B．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性，B正确；
C．不同种类的微生物的碳源可能不同，如自养生物一般利用无机碳源，C正确；
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-20℃保藏的方法，D错误。
故选D。
6．【答案】D
【解析】
试题分析：
病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA），必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。因此病毒离开了宿主细胞，就成了没有任何生命活动．也不能独立自我繁殖的化学物质。它的复制．转录．和转译的能力都是在宿主细胞中进行，当它进入宿主细胞后，它就可以利用细胞中的物质和能量完成生命活动，按照它自己的核酸所包含的遗传信息产生和它一样的新一代病毒。
解答：
AB两种培养基种不含活细胞，病毒不能存活，牛肉汤是给培养基提供氮源的物质，也不含活细胞不能让病毒存活，活鸡胚中具有活细胞，能够给病毒的存活提供条件，ABC错误；D正确。
故选D。
7．【答案】B
【解析】
试题分析：
对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验。判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基属于对照组。
解答：
为了判断培养基是否被杂菌污染，需要设置的对照组是未接种的培养基，即将未接种的培养基与接种的培养基同时培养，若未接种的培养基上出现菌落，说明其被污染，否则没有被污染；用接种了的普通培养基和选择培养基进行对照，在牛肉育蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基具有选择的功能，B正确。
故选B。
8．【答案】D
【解析】
试题分析：
纯化大肠杆菌
（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
（2）微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
解答：
A．培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，A正确；
B．测定其数目可采用滤膜法，B正确；
C．培养过程包括培养基的配制和纯化，C正确；
D．接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物的计数，因此要对微生物进行计数时应该采用稀释涂布平板法，D错误。
故选D。
9．【答案】D
【解析】
试题分析：
根据表格分析，培养基Ⅲ成分完全，属于完全培养基，能培养异养和自养型微生物；培养基Ⅱ有氮源缺乏碳源，能培养自养型微生物；培养基Ⅰ有碳源无氮源，能培养异养型固氮微生物。
解答：
根据题干信息，甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能，说明甲能够自身固氮，属于固氮微生物；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，而甲和丙都不能，说明乙能够制造有机物，属于自养型微生物；而丙不能在Ⅰ培养基和Ⅱ培养基中生长，说明不能固氮和合成有机物，属于异养型微生物。
故选D。
10．【答案】D
【解析】
试题分析：
无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
解答：
A．实验前需用75%的酒精棉球擦拭双手，进行消毒，A正确；
B．配制好的培养基可通过高压蒸汽进行灭菌，B正确；
C．接种环可以通过酒精灯火焰灼烧进行灭菌，C正确；
D．为防止污染环境，使用后的培养基需要灭菌，才能丢弃到指定的地方，D错误。
故选D。
11．【答案】B
【解析】
试题分析：
据题表分析：该培养基加入了琼脂，故为固体培养基；稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，一个菌落代表一个单细胞；Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要碳源；Ⅰ与Ⅱ对照说明大肠杆菌的生长需要生长因子。
解答：
A．该培养基加入了琼脂，故为固体培养基，A错误；
B．该实验中应该选取培养 12 小时时的记录作为实验结果，B正确；
C．Ⅰ与Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要葡萄糖，但不能证明是否需要特殊营养物质，C错误；
D．Ⅱ和Ⅲ对照，自变量是有无葡萄糖，说明大肠杆菌的生长需要碳源如葡萄糖，但不能确定葡萄糖是唯一碳源，D错误。
故选B。
12．【答案】C
【解析】
试题分析：
用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行，其中制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算．称量．溶化．灭菌．倒平板。微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。
解答：
①蛋白胨只能提供碳源．氮源．维生素，①错误；
②待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，②错误；
③待平板冷却凝固约5～10min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿低在上，③正确；
④制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，④错误；
⑤将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，⑤正确。
故选C。
13．【答案】D
【解析】
试题分析：
培养基的概念．种类及营养构成：（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 （2）种类：固体培养基和液体培养基。（3）营养构成：各种培养基一般都含有水．碳源．氮源．无机盐，此外还要满足微生物生长对pH．特殊营养物质以及氧气的要求。
解答：
A．培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微酸性，A错误；
B．固定培养基可用于观察菌落，液体培养基可用于工业生产，B错误；
C．培养基一般都含有水．碳源．氮源和无机盐，有些微生物的培养除了上述几种主要营养物质外，还需要添加生长因子，有的微生物培养基中可以不加碳源，如自养型的；C错误；
D．培养基一般都含有水．碳源．氮源和无机盐。微生物的生长除了受到以上营养因素的影响外，还受到pH．O2．渗透压等的影响，D正确。
故选D。
14．【答案】A
【解析】
试题分析：
菌落是指由一个微生物细胞在适宜的培养基上形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体．不同种类的细菌所形成的菌落，在大小．形状．光泽度．颜色．硬度．透明度等方面具有一定的特征，每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。
解答：
A．同种类的细菌所形成的菌落，在大小．形状．光泽度．颜色．硬度．透明度等方面具有一定的特征，可以作为菌种鉴定的重要依据，A正确；
B．单个细菌个体微小，用肉眼是看不见的，细菌形态不适合作为菌种鉴定的依据，B错误；
C．单个细菌个体微小，细菌体积不适合作为菌种鉴定的依据，C错误；
D．细菌都属于原核生物，形体微小，结构大同小异，不适合作为菌种鉴定的依据，D错误。
故选A。
15．【答案】C
【解析】
试题分析：
16．【答案】B
【解析】
试题分析：
无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
解答：
A．应设置未接种的培养基，作为实验的对照，以检测培养基灭菌是否彻底，A正确；
B．要检测水体中大肠杆菌是否超标，待检测水样不能进行灭菌处理，B错误；
C．可用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数，C正确；
D．平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，D正确。
故选B。
17．【答案】A
【解析】
试题分析：
无菌技术的主要内容①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
解答：
A．煮沸属于消毒，可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，A正确；
B．家庭制作葡萄酒时，要将容器进行消毒或者灭菌，葡萄则需要冲洗即可，B错误；
C．加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，否则可能会污染培养基，C错误；
D．用自然生长的离体植物组织进行组织培养时，需要进行消毒，D错误。
故选A。
18．【答案】D
【解析】
试题分析：
常用的微生物分离方法有平板划线法，稀释涂布法。
一．平板划线分离法：
由接种环从菌液中沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线．扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。
二．稀释涂布平板法：
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。
解答：
A．B．C选项的固体培养基上所形成的是一个个的单个菌落，是用稀释涂布法培养细菌得到的结果，D选项的固体培养基上所形成的不是单菌落，是平板划线分离得到的结果。
故选D。
培养皿
培养基成分
菌落数
Ⅰ
琼脂．葡萄糖
35
Ⅱ
琼脂．葡萄糖．特殊营养物质
250
Ⅲ
琼脂．特殊营养物质
0
1．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述正确的是（ ）
A．操作顺序为计算．称量．溶化．倒平板．灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C．待培养基冷却至44℃以下时进行倒平板
D．待平板冷却凝固约5～10s后将平板倒过来放置
2．下列关于配制培养基的叙述中正确的是（ ）
A．制作固体培养基一定要加入琼脂
B．加入青霉素的培养基可培养放线菌
C．培养自生固氮菌的培养基中不需添加氮源
D．发酵工程一般用固体培养基
3．下列有关无菌技术的叙述错误的是（ ）
A．对实验操作空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒
B．用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基要进行灭菌
C．高压蒸汽灭菌锅需将冷空气彻底排除后才能将锅密闭
D．使用后的液体培养基在丢弃前要用煮沸消毒法进行处理
4．下列叙述正确的是（ ）
A．培养细菌时需将培养基的温度调至15~18℃
B．在进行稀释涂布平板法操作时，需要连续画线，且起点和终点不相连
C．倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置
D．大肠杆菌纯化培养只可以用平板划线法
5．微生物的实验室培养中，有关叙述不正确的是（ ）
A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性
C．不同种类的微生物的碳源可能不同
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-4℃保藏的方法
6．培养禽流感病毒时，应该选用（ ）
A．固体培养基B．液体培养基
C．牛肉汤D．活鸡胚
7．为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组的培养基分别是（ ）
A．未接种的选择培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
B．未接种的培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
C．接种了的选择培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D．接种了的培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
8．下列有关大肠杆菌纯化培养和计数的叙述，错误的是（ ）
A．培养基的pH应是中性或微碱性
B．测定其数目可采用滤膜法
C．培养过程包括培养基的配制和纯化
D．接种只能采用平板划线法
9．甲．乙．丙是三种微生物，下表Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲．乙．丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲．丙都不能。下列说法正确的是（ ）
注：“+”表示培养基中加入了这种物质，“-”表示培养基中没有加入这种物质。
A．甲．乙．丙都是异养型微生物
B．甲．乙都是自养型微生物，丙是异养型微生物
C．甲是自养微生物．乙是异养微生物．丙是固氮微生物
D．甲是固氮微生物．乙是自养微生物．丙是异养微生物
10．关于微生物培养中的无菌技术，叙述错误的是（ ）
A．实验前需用 75%的酒精棉球擦拭双手
B．配制好的培养基可通过高压蒸汽进行灭菌
C．接种环可以通过酒精灯火焰灼烧进行灭菌
D．使用后的培养基不需要灭菌可直接丢弃
粉状硫
10g
K2HPO4
4g
FeSO4
0．5g
蔗糖
10g
（NH4）2SO4
0．4g
H2O
100ml
MgSO4
9．25g
CaCl2
0．5g
Ⅰ
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Ⅱ
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Ⅲ
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11．在三个培养皿中分别加入 10mL 不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养后，计算菌落数，结果如下表。下列选项正确的是（ ）
A．该实验采用的是液体培养基
B．该实验中应该选取培养 12 小时时的记录作为实验结果
C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要特殊营养物质
D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要糖类
12．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是（ ）
①牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源．氮源．磷酸盐．维生素
②等培养基冷却至室温时进行倒平板
③待平板冷却凝固5？10分钟后将平板倒过来放置
④操作顺序为计算．称量．溶化．倒平板．灭菌
⑤将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解
A．①④⑤B．②③⑤C．①②④D．②④⑤
13．下列有关微生物培养基种类及配制原则的表述，正确的是（ ）
A．培养霉菌时需将培养基的 pH 调节到中性或微碱性
B．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产
C．任何培养基都必须含有碳源．氮源．水．无机盐及生长因子
D．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到 pH．O2．渗透压等的影响
14．通常用来作为菌种鉴定的重要依据是
A．菌落B．细菌形态C．细菌体积D．细菌结构
15．关于干热灭菌与高压蒸汽灭菌的操作方法，下列叙述正确的是（ ）
①操作时，均不能将物品摆放太挤
②操作过程中，灭菌物品均不能与筒壁接触
③干热灭菌时，等温度下降到70℃以下后，才能打开箱门
④高压蒸汽灭菌时，打开排气阀使压力表降到零后，才能打开盖
A．①②④B．②③④C．①②③D．①③④
16．科研小组欲检测学校直饮水中大肠杆菌是否超标，下列实验操作中不合理的是（ ）
A．应设置未接种的培养基作为对照
B．待检测水样需要经过灭菌操作后再检测
C．用稀释涂布平板法接种并计数大肠杆菌
D．接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养
17．许多生物学实验十分重视无菌操作，防止杂菌污染。下列操作正确的是（ ）
A．煮沸可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢
B．家庭制作葡萄酒时，要将容器和葡萄进行灭菌
C．加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
D．用自然生长的离体植物组织进行组织培养时，不需要进行消毒
18．若在固体培养基上用稀释涂布法培养细菌，看到的结果不可能是
A．B．
C．D．
参考答案与试题解析
1．【答案】B
【解析】
试题分析：
培养基的配制流程：计算．称量．溶化．灭菌（高压蒸汽灭菌）．倒平板（无菌操作）。
解答：
A．操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，A错误；
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，因为牛肉膏会黏在称量纸上，B正确；
C．待培养基冷却至50℃以下时进行倒平板，C错误；
D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置，D错误。
故选B。
2．【答案】C
【解析】
试题分析：
3．【答案】D
【解析】
试题分析：
微生物分离的基本步骤为配制培养基．接种．培养筛选等。无菌培养，是指在灭菌条件下进行的培养试验。首先要对培养材料灭菌，其次对所使用的容器．介质．营养液等都要高压灭菌，在试验全过程中严格检测无菌条件。
解答：
A．为避免杂菌污染，对实验操作空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒，A正确；
B．用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基要进行灭菌，一般是进行高压蒸汽灭菌，B正确；
C．高压蒸汽灭菌锅需将冷空气彻底排除后才能将锅密闭，否则冷空气的存在会影响灭菌效果，C正确；
D．使用后的液体培养基在丢弃前要用高压蒸汽灭菌法进行处理，D错误。
故选D。
4．【答案】C
【解析】
试题分析：
本题主要考查微生物的分裂和培养的相关知识，要求考生识记平板划线法和稀释涂布平板法的操作步骤，属于考纲识记和理解层次的考查。
解答：
A．不同细菌适宜生存的温度不同，因此需要根据不同的细菌调节不同的温度，A错误；
B．在进行平板划线法操作时，需要连续画线，且起点和终点不相连，B错误；
C．倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置，防止冷凝水污染培养基，C正确；
D．大肠杆菌纯化培养可以采用平板划线法或稀释涂布平板法，D错误。
故选C。
5．【答案】D
【解析】
试题分析：
菌种临时保藏为4℃斜面培养基保存，长期保存可-20℃甘油管藏。
解答：
A．对于频繁使用的菌种，长期保存不适合取用，故用临时保藏的方法，A正确；
B．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性，B正确；
C．不同种类的微生物的碳源可能不同，如自养生物一般利用无机碳源，C正确；
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-20℃保藏的方法，D错误。
故选D。
6．【答案】D
【解析】
试题分析：
病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA），必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。因此病毒离开了宿主细胞，就成了没有任何生命活动．也不能独立自我繁殖的化学物质。它的复制．转录．和转译的能力都是在宿主细胞中进行，当它进入宿主细胞后，它就可以利用细胞中的物质和能量完成生命活动，按照它自己的核酸所包含的遗传信息产生和它一样的新一代病毒。
解答：
AB两种培养基种不含活细胞，病毒不能存活，牛肉汤是给培养基提供氮源的物质，也不含活细胞不能让病毒存活，活鸡胚中具有活细胞，能够给病毒的存活提供条件，ABC错误；D正确。
故选D。
7．【答案】B
【解析】
试题分析：
对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验。判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基属于对照组。
解答：
为了判断培养基是否被杂菌污染，需要设置的对照组是未接种的培养基，即将未接种的培养基与接种的培养基同时培养，若未接种的培养基上出现菌落，说明其被污染，否则没有被污染；用接种了的普通培养基和选择培养基进行对照，在牛肉育蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基具有选择的功能，B正确。
故选B。
8．【答案】D
【解析】
试题分析：
纯化大肠杆菌
（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
（2）微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
解答：
A．培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，A正确；
B．测定其数目可采用滤膜法，B正确；
C．培养过程包括培养基的配制和纯化，C正确；
D．接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物的计数，因此要对微生物进行计数时应该采用稀释涂布平板法，D错误。
故选D。
9．【答案】D
【解析】
试题分析：
根据表格分析，培养基Ⅲ成分完全，属于完全培养基，能培养异养和自养型微生物；培养基Ⅱ有氮源缺乏碳源，能培养自养型微生物；培养基Ⅰ有碳源无氮源，能培养异养型固氮微生物。
解答：
根据题干信息，甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能，说明甲能够自身固氮，属于固氮微生物；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，而甲和丙都不能，说明乙能够制造有机物，属于自养型微生物；而丙不能在Ⅰ培养基和Ⅱ培养基中生长，说明不能固氮和合成有机物，属于异养型微生物。
故选D。
10．【答案】D
【解析】
试题分析：
无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
解答：
A．实验前需用75%的酒精棉球擦拭双手，进行消毒，A正确；
B．配制好的培养基可通过高压蒸汽进行灭菌，B正确；
C．接种环可以通过酒精灯火焰灼烧进行灭菌，C正确；
D．为防止污染环境，使用后的培养基需要灭菌，才能丢弃到指定的地方，D错误。
故选D。
11．【答案】B
【解析】
试题分析：
据题表分析：该培养基加入了琼脂，故为固体培养基；稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，一个菌落代表一个单细胞；Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要碳源；Ⅰ与Ⅱ对照说明大肠杆菌的生长需要生长因子。
解答：
A．该培养基加入了琼脂，故为固体培养基，A错误；
B．该实验中应该选取培养 12 小时时的记录作为实验结果，B正确；
C．Ⅰ与Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要葡萄糖，但不能证明是否需要特殊营养物质，C错误；
D．Ⅱ和Ⅲ对照，自变量是有无葡萄糖，说明大肠杆菌的生长需要碳源如葡萄糖，但不能确定葡萄糖是唯一碳源，D错误。
故选B。
12．【答案】C
【解析】
试题分析：
用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行，其中制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算．称量．溶化．灭菌．倒平板。微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。
解答：
①蛋白胨只能提供碳源．氮源．维生素，①错误；
②待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，②错误；
③待平板冷却凝固约5～10min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿低在上，③正确；
④制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，④错误；
⑤将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，⑤正确。
故选C。
13．【答案】D
【解析】
试题分析：
培养基的概念．种类及营养构成：（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 （2）种类：固体培养基和液体培养基。（3）营养构成：各种培养基一般都含有水．碳源．氮源．无机盐，此外还要满足微生物生长对pH．特殊营养物质以及氧气的要求。
解答：
A．培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微酸性，A错误；
B．固定培养基可用于观察菌落，液体培养基可用于工业生产，B错误；
C．培养基一般都含有水．碳源．氮源和无机盐，有些微生物的培养除了上述几种主要营养物质外，还需要添加生长因子，有的微生物培养基中可以不加碳源，如自养型的；C错误；
D．培养基一般都含有水．碳源．氮源和无机盐。微生物的生长除了受到以上营养因素的影响外，还受到pH．O2．渗透压等的影响，D正确。
故选D。
14．【答案】A
【解析】
试题分析：
菌落是指由一个微生物细胞在适宜的培养基上形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体．不同种类的细菌所形成的菌落，在大小．形状．光泽度．颜色．硬度．透明度等方面具有一定的特征，每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。
解答：
A．同种类的细菌所形成的菌落，在大小．形状．光泽度．颜色．硬度．透明度等方面具有一定的特征，可以作为菌种鉴定的重要依据，A正确；
B．单个细菌个体微小，用肉眼是看不见的，细菌形态不适合作为菌种鉴定的依据，B错误；
C．单个细菌个体微小，细菌体积不适合作为菌种鉴定的依据，C错误；
D．细菌都属于原核生物，形体微小，结构大同小异，不适合作为菌种鉴定的依据，D错误。
故选A。
15．【答案】C
【解析】
试题分析：
16．【答案】B
【解析】
试题分析：
无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
解答：
A．应设置未接种的培养基，作为实验的对照，以检测培养基灭菌是否彻底，A正确；
B．要检测水体中大肠杆菌是否超标，待检测水样不能进行灭菌处理，B错误；
C．可用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数，C正确；
D．平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，D正确。
故选B。
17．【答案】A
【解析】
试题分析：
无菌技术的主要内容①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
解答：
A．煮沸属于消毒，可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，A正确；
B．家庭制作葡萄酒时，要将容器进行消毒或者灭菌，葡萄则需要冲洗即可，B错误；
C．加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，否则可能会污染培养基，C错误；
D．用自然生长的离体植物组织进行组织培养时，需要进行消毒，D错误。
故选A。
18．【答案】D
【解析】
试题分析：
常用的微生物分离方法有平板划线法，稀释涂布法。
一．平板划线分离法：
由接种环从菌液中沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线．扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。
二．稀释涂布平板法：
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。
解答：
A．B．C选项的固体培养基上所形成的是一个个的单个菌落，是用稀释涂布法培养细菌得到的结果，D选项的固体培养基上所形成的不是单菌落，是平板划线分离得到的结果。
故选D。
培养皿
培养基成分
菌落数
Ⅰ
琼脂．葡萄糖
35
Ⅱ
琼脂．葡萄糖．特殊营养物质
250
Ⅲ
琼脂．特殊营养物质
0
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